操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:CK2α (phospho-Thr360/Ser362) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
人血纤蛋白原Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit 96T
卷曲螺旋结构域蛋白82抗体英文名称:CCDC82 0.2ml B细胞连接蛋白(BLNK)ELISA试剂盒 BLNK ELISA Kit
嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体英文名称:CCL24 0.2ml 兴奋性氨基酸转运蛋白3(EAAT3)ELISA试剂盒 EAAT3 ELISA Kit
磷酸化转录因子E2F-1抗体英文名称:phospho-E2F1 (Ser337) 0.1ml 神经突蛋白1(NRN1)ELISA试剂盒 NRN1 ELISA Kit
Ras GTP酶活化蛋白结合蛋白1抗体英文名称:G3BP1 0.1ml 胱天蛋白酶6(CASP6)ELISA试剂盒 CASP6 ELISA Kit
髓系细胞触发受体1抗体英文名称:TREM1 0.2ml
磷酸化原癌基因c-Jun抗体英文名称:phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 0.1ml Paralemmin2蛋白(PALM2)ELISA试剂盒 PALM2 ELISA Kit
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体英文名称:Phospho-MKP1 (Ser296) 0.1ml
小肠结肠炎耶尔森氏 膜通道蛋白抗体英文名称:ompF 1ml
磷酸化丝氨酸/苏氨酸抗体英文名称:Phosphoserine/threonine 0.1ml
DIRAS2蛋白抗体英文名称:DIRAS2 0.2ml 细胞周期素M1(CCNM1)ELISA试剂盒 CCNM1 ELISA Kit
磷酸化WEE1蛋白抗体英文名称:Phospho-Wee1(Ser53) 0.1ml
兔抗大鼠IgMRabbit Anti-rat IgM 1mg
Alexa Fluor 647标记的驴抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml
磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原Glypican 4(Glypican proteoglycan 4) 0.5mg
Alexa Fluor 350标记羊IgG(细胞流式同型对照)Goat IgG/Alexa Fluor 350 0.1ml
CK2α (phospho-Thr360/Ser362) Antibody游离生物素测定培养基 250用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定 摩氏摩根菌 冻干粉
霍乱菌培养基TCBS (CM0333) Oxoid 变化考克氏菌 冻干粉
毛滴虫培养基基础 (CM0161) Oxoid 无枝菌酸棒杆菌 冻干粉
假单细胞分离琼脂 用甘油在色素形成基础上选择分离、鉴别铜绿假单胞菌500g 粘金黄杆菌 冻干粉
TB medium acc.to LOENSTIN-JENSEN( base) TB培养基(基础) 1.05400.0500MERCK默克 产吲哚金黄杆菌 冻干粉
查普曼琼脂/葡萄状球菌选择琼脂 唐菖蒲伯克霍尔德菌 冻干粉
沙门氏菌显色培养基B 25000 mL/瓶 蜂房类芽孢杆菌 冻干粉
碱性蛋白胨水(APW) 250(g) 浸麻类芽孢杆菌 冻干粉
改良V-P培养基 250(g) 气味沙雷氏菌 冻干粉
SS琼脂 1000(g) 球形芽孢杆菌 冻干粉
假单胞菌琼脂基础 (CM0559) Oxoid 冬青节杆菌 冻干粉
Crossley Milk Medium/Crossley 牛奶培养基 Oxoid500G Acinetobacter radioresistens 冻干粉
Malt Extract Agar Aeromonas aquariorum 冻干粉
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