操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:PTEN (Ab-380/382/383) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
磷酸化真核翻译延长因子2抗体英文名称:Phospho-EEF2 (Thr57) 0.1ml 乳酸脱氢酶C(LDHC)ELISA试剂盒 LDHC ELISA Kit
磷酸化周期素依赖性激酶5抗体英文名称:phospho-CDK5(Tyr15) 0.1ml 金属硫蛋白2(MT2)ELISA试剂盒 MT2 ELISA Kit
CP2相关转录抑制因子1抗体英文名称:CRTR1 0.1ml 组蛋白脱乙酰基酶4(HDAC4)ELISA试剂盒 HDAC4 ELISA Kit
乙酰胆碱酯酶相关蛋白抗体英文名称:CUTA 0.1ml 原钙黏素α4(PCDHα4)ELISA试剂盒 PCDHα4 ELISA Kit
核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体英文名称:ENPP1 0.2ml 羧肽酶A4(CPA4)ELISA试剂盒 CPA4 ELISA Kit
Fbxw7蛋白抗体英文名称:Fbxw7 0.2ml 磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)ELISA试剂盒 PGK1 ELISA Kit
γ谷氨酰转肽酶2轻链抗体英文名称:GGT2 light chain 0.1ml 干扰素α5(IFNα5)ELISA试剂盒 IFNα5 ELISA Kit
IQCC蛋白抗体英文名称:IQCC 0.2ml 阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1β(SCNN1β)ELISA试剂盒 SCNN1β ELISA Kit
线粒体核糖体蛋白S4抗体英文名称:MRPS4 0.1ml 43kDa核孔蛋白(NUP43)ELISA试剂盒 NUP43 ELISA Kit
10号染色体开放阅读框47抗体英文名称:C10orf47 0.2ml P21蛋白(P21)ELISA试剂盒 P21 ELISA Kit
过氧化酶活化增生受体γ抗体(PPARγ)英文名称:PPAR gamma 0.1ml
卵子结合**碱性螺旋蛋白抗体英文名称:Sohlh1 0.2ml
Tar DNA 结合蛋白43抗体英文名称:TARDBP 0.1ml
磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体英文名称:Phospho-Smad2(Ser245 + Ser250 + Ser255) 0.1ml
半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗原(人)Caspase-12(hunman) 0.5mg
微管相关蛋白(抗原)Tau protein 0.5mg
PTEN (Ab-380/382/383) Antibody***检定培养基4号 250(g) 杂色曲霉 冻干粉
BBL琼脂培养基基础 250(g) 焦曲霉 冻干粉
D/E中和琼脂 250(g) 泡盛曲霉 冻干粉
气单胞菌培养基基础 250用于气单胞菌分离培养 宇佐美曲霉 冻干粉
产气荚膜菌琼脂基础 (OPSP) (CM0543) Oxoid 栖土曲霉 冻干粉
Peptone P 蛋白胨P Oxoid500g 土曲霉 冻干粉
Pseudomonas Isolation Agar 酱油曲霉 冻干粉
TCBS agar Vibrio selective agar TCBS琼脂/弧菌选择琼脂 1.10263.0500MERCK默克 寄生曲霉 冻干粉
***显色培养基A 1000 mL/瓶 嗜热链霉菌 冻干粉
China blue-lactose agar 中国蓝乳糖琼脂 1.02348.0500MERCK默克 米曲霉 冻干粉
碱性蛋白胨水(APW) 1000(g) 华美链霉菌 冻干粉
亚利桑那琼脂(SA) 100(g) 玫瑰色链霉菌 冻干粉
R2A 琼脂 250(g) 龟裂链霉菌 冻干粉
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