ASK1 (Ab-83) Antibody

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：ASK1 (Ab-83) Antibody
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
转录因子3抗体（螺旋环螺旋蛋白HE47）英文名称：TCF3 0.2ml  

磷酸化蛋白激酶C抗体 PKC ε英文名称：phospho-PKC Epsilon（Ser729） 0.1ml  

丝氨酸蛋白酶抑制剂B12抗体英文名称：SERPINB12 0.2ml  

Cy5.5标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/Cy5.5 0.1ml  

癌相关抗原抗原CA15-3 peptide 0.2mg  

hypothetical protein 抗原hypothetical protein (LOC55652) 0.5mg  

紧密连接蛋白3抗体英文名称：Claudin 3 0.1ml  果糖胺(FRA)ELISA试剂盒  FRA ELISA Kit

小鼠水通道蛋白5AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 96T  

大鼠迟现抗原VLA ELISA Kit 96T  

人神经保护肽HN ELISA试剂盒Humanin ELISA Kit muman 96T  

抗**  1A抗体英文名称：AVPR1A 0.2ml  细胞角蛋白20(CK-20)ELISA试剂盒  CK-20 ELISA Kit

罗丹明标记的兔抗狗IgGRabbit Anti-dog IgG/RBITC 0.3ml  

CD13氨肽酶N抗体英文名称：CD13 0.1ml  变肾上腺素(MN)ELISA试剂盒  MN ELISA Kit

6号染色体开放阅读框165抗体英文名称：C6orf165 0.2ml  脂生蛋白(ADIG)ELISA试剂盒  ADIG ELISA Kit

延伸突触蛋白1抗体英文名称：ESYT1 0.2ml  杀伤细胞凝集素样受体亚家族A成员1(KLRA1)ELISA试剂盒  KLRA1 ELISA Kit

FBXL12蛋白抗体英文名称：FbxL12 0.2ml  脑指蛋白(BFP)ELISA试剂盒  BFP ELISA Kit

ASK1 (Ab-83) AntibodyMFC培养基    250(g) 落 PCR 试剂盒 2.050 次

乳糖胆盐发酵培养基    1000(g) IPTG 干粉2.5g

无盐麦康凯琼脂 (CM0007b)    Oxoid　 IPTG 溶液，200mg/mL1.5mL

加强梭状芽孢杆培养基 (RCM) (semi-solid) (CM0149)    Oxoid　 X-Gal 干粉0.5g

D/E (Dey/Engley) Neutralizing Agar     X-Gal 溶液，20mg/mL10mL

VJ Agar Vogel-Johnson     免质粒提取筛选试剂盒1000 次

MRSA显色培养基    用于耐甲氧西林金黄色葡萄球的分离和鉴定1000ml 可溶性两性霉素 B 溶液 ,20mg/mL1mL

3%氯化钠碱性蛋白胨水（APW）    250(g) 氨苄青霉素溶液 ,50mg/mL10mL

VRE显色培养基    用于耐万古霉素肠球的分离及鉴定1000ml 杆肽溶液 ,100mg/mL1mL

蛋白胨水 (Andrade)    Oxoid　 氨苄青霉素干粉1g

拟杆选择性培养基基础（改良GAM琼脂基础）    250(g) 博莱霉素溶液 ,10mg/mL1mL

察氏培养基    250(g) 羧苄青霉素钠溶液 ,50mg/mL1mL

卡那霉素七叶甙叠氮琼脂基础(CM0591)    Oxoid　 噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL

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