操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:Met (Ab-1234) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
三(4,7-二苯基-1,10-菲绕啉酯)氯化钠钌(1mM 溶液) Tris(bathophenanthrolinedisulfonate)ruthenium(II) sodium salt solution 301206-84-8 质量规格:1mM,BC 组织赖氨酸(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
胰蛋白酶原 Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 2594173 质量规格:BC 血液赖氨酸(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
色胺(>98%,BR) Tryptamine 61-54-1 质量规格:>98%,BR 体液赖氨酸(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
三氧化钨(>99%,BC) Tungsten (VI) oxide 1314-35-8 质量规格:>99%,BC 植物赖氨酸(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
碳化钨200(>99%,BC) Tungsten carbide-200 12070-12-1 质量规格:>99%,BC 通用型赖氨酸(lysine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
钨粉(200目)(>99.8%,BR) Tungsten powder 7440-33-7 质量规格:>99.8%,BR 细胞赖氨酸(lysine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
钨酸(>98%,BC) Tungstic (VI) acid 2148783 质量规格:>98%,BC 组织赖氨酸(lysine)量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
震颤真(>98%,BC) Verruculogen from Penicillium verruculosum 12771-72-1 质量规格:>98%,BC 血液赖氨酸(lysine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
羊毛脂 Wool fat 8006-54-0 质量规格:BR 体液赖氨酸(lysine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
5-溴-4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸钠盐 X-GLUC, sodium salt 129541-41-9 质量规格:>98%,分子生物学级 植物赖氨酸(lysine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
玉米烯酮(>98% (HPLC),BC) Zearalenone from Giberella zeae 17924-92-4 质量规格:>98% (HPLC),BC 组氨酸(leucine)含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
碱式碳酸锌 Zinc carbonate basic 1228348 质量规格:BR 组氨酸(leucine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
硬脂酸锌 Zinc distearate 557-05-1 质量规格:BR 饮料糖精(saccharin)含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
氢氧化锌(>98%,BR) Zinc hydroxide 20427-58-1 质量规格:>98%,BR 糖果糖精(saccharin)含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
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大鼠细胞周期素D2(CCND2)ELISA试剂盒 英文名: CCND2 ELISA Kit
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小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 英文名: hs-CRP ELISA Kit
大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒 英文名: CsA ELISA Kit
小鼠血管**素4(ANG-4)ELISA试剂盒 英文名: ANG-4 ELISA Kit
小鼠胆囊收缩素B受体(CCKBR)ELISA试剂盒 英文名: CCKBR ELISA Kit
大鼠纤维蛋白原β(FGβ)ELISA试剂盒 英文名: FGβ ELISA Kit
小鼠γ-氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒 英文名: GABA ELISA Kit
大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 英文名: MBP ELISA Kit
大鼠α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA试剂盒 英文名: α1AGP ELISA Kit
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