Caspase 3 Antibody

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：Caspase 3 Antibody
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC)) 4'-Butoxyacetophenone 5736-89-0 质量规格：>98.0%(GC)  组织牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）定量PCR扩增检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

4'-己基苯乙酮(>96.0%(GC)) 4'-Hexylacetophenone 37592-72-6 质量规格：>96.0%(GC)  血液牛病��性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）定量PCR扩增检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC)) 4'-Heptylacetophenone 37593-03-6 质量规格：>96.0%(GC)  体液牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）定量PCR扩增检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC)) 4'-n-Octylacetophenone 10541-56-7 质量规格：>95.0%(GC)  牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒 进口/国产 规格：2次

4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC)) 4'-Pentylacetophenone 37593-02-5 质量规格：>95.0%(GC)  通用型牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定性基因检测试剂盒    进口/国产 规格：20次

4-(反-4-丙基环己基)苯腈(>98.0%(GC)) 4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile 61203-99-4 质量规格：>98.0%(GC)  细胞牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定性基因检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

1-溴-4-正辛基苯(>99.0%(GC)(T)) trans-4-Butylcyclohexanecarboxylic Acid 38289-28-0 质量规格：>99.0%(GC)(T)  组织牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定性基因检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

1-溴-4-壬基苯(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-nonylbenzene 51554-94-0 质量规格：>95.0%(GC)  血液牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定性基因检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

1-溴-4-戊苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-pentylbenzene 51554-95-1 质量规格：>90.0%(GC)  体液牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定性基因检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

1-溴-4-己苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-hexylbenzene 23703-22-2 质量规格：>90.0%(GC)  通用型牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定量PCR扩增检测试剂盒    进口/国产 规格：20次

1-溴-4-庚苯(含稳定剂铜屑)(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-heptylbenzene (stabilized with Copper chip) 76287-49-5 质量规格：>95.0%(GC)  细胞牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定量PCR扩增检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

1-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-n-octylbenzene 51554-93-9 质量规格：>90.0%(GC)  组织牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定量PCR扩增检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC)) 1-Bromo-4-decylbenzene 106418-67-1 质量规格：>88.0%(GC)  血液牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定量PCR扩增检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC)) 1-Bromo-4-dodecylbenzene 126930-72-1 质量规格：>90.0%(GC)  体液牛病毒性腹泻病毒I型（Bovine Viral Diarrhoea Virus -1；BVDV-1）定量PCR扩增检测试剂盒   进口/国产 规格：20次

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