【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！
产品名称：游离脂肪酸（NEFA）含量测定试剂盒
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
2、灵敏度高，操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
二苯基碘鎓六氟磷酸盐(>97.0%(T)) Diphenyliodonium Hexafluorophosphate 58109-40-3 质量规格：>97.0%(T) DNA探针地高辛聚合酶整合标记试剂盒 进口/国产 规格：10次
2-(4-甲氧苯基)-4,6-双(三氯甲基) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine 3584-23-4 质量规格：>98.0%(GC) 随机引物DNA探针地高辛聚合酶标记试剂盒 进口/国产 规格：10次
三苯基溴化锍(>98.0%(T)) Triphenylsulfonium Bromide 3353-89-7 质量规格：>98.0%(T) PCR探针地高辛TAG聚合酶标记试剂盒 进口/国产 规格：10次
基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化铵(>98.0%(T)) Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 84901-27-9 质量规格：>98.0%(T) 3′端DNA地高辛转移酶标记试剂盒 进口/国产 规格：10次
1-[3-(氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N)) 1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea 23843-64-3 质量规格：>94.0%(N) RNA探针地高辛聚合酶标记试剂盒 进口/国产 规格：10次
苄酰基无色亚甲基兰(>95.0%(HPLC)(T)) Benzoyl Leuco Methylene Blue 1249-97-4 质量规格：>95.0%(HPLC)(T) 3′端DNA生物素转移酶标记试剂盒 进口/国产 规格：10次
结晶紫内酯(>95.0%(HPLC)(T)) Crystal Violet Lactone 1552-42-7 质量规格：>95.0%(HPLC)(T) 3′端DNA生物素转移酶标记鉴定试剂盒 进口/国产 规格：10次
6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基荧烷(>98.0%(HPLC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran 21934-68-9 质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 生物素标记封闭溶液 进口/国产 规格：100毫升
6'-(二乙氨基)-1',2'-苯并荧烷(>98.0%(GC)(T)) 6'-(Diethylamino)-1',2'-benzofluoran 26628-47-7 质量规格：>98.0%(GC)(T) 10% TWEEN 20溶液 进口/国产 规格：100毫升
2'-(二苄氨基)-6'-(二乙氨基)荧烷(>98.0%(HPLC)(T)) 2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran 34372-72-0 质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 95% TWEEN 20溶液 进口/国产 规格：100毫升
3',6'-二甲氧基荧烷(>98.0%(HPLC)) 3',6'-Dimethoxyfluoran 36886-76-7 质量规格：>98.0%(HPLC) 10%TWEEN 80溶液 进口/国产 规格：100毫升
1,1'-亚甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC)) 1,1'-Methylenedi-2-naphthol 1096-84-0 质量规格：>97.0%(GC) 10%Triton X-100溶液 进口/国产 规格：100毫升
2-萘基苄基醚(>98.0%(GC)) Benzyl 2-Naphthyl Ether 613-62-7 质量规格：>98.0%(GC) 10%Triton X-114溶液 进口/国产 规格：100毫升
己酰胺(>98.0%(N)) Hexanamide 628-02-4 质量规格：>98.0%(N) 10%NP-40溶液 进口/国产 规格：100毫升
游离脂肪酸（NEFA）含量测定试剂盒小鼠脑啡肽（ENK）ELISA试剂盒96T试剂盒 组装/原装
小鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内皮抑素(ES)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内皮素1(ET-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠内(ET)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作步骤(仅供参考)：
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
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