注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称：人附睾蛋白4ELISA检测试剂盒
英文名称：epididymis protein 4
检测范围：1.5pmol/L~48pmol/L
灵敏度：0.1
产品货号：BJ-H63792
规格：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
组成：
48孔配制：
1.说明书: 1份
2. 封板膜: 2片（48）
3. 密封袋: 1个
4 酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1. 产品名称说明书:1份
2. 封板膜:2片（96）
3. 密封袋: 1个
4. 酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr；
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min；
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温
度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，
直接进入第 5 步封闭。
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜；
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育
30 min；
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37
℃湿盒中孵育 30 min；
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）；
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色；
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
17.观察成像： 显微镜下观察成像。
注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。���色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准
异鼠李素-3-O-半乳糖苷;Isorha CAS号： 6743-92-6 规格： 10mg 订购|咨询
茵芋碱;Skimmianine CAS号： 83-95-4 规格： 20mg 订购|咨询
一枝蒿庚素;Bullatine G；so CAS号： 509-24-0 规格： 10mg 订购|咨询
乙酰蝙蝠葛苏林碱;O-diacetyld CAS号： 规格： 10mg 订购|咨询
一叶萩碱;Securinine CAS号： 5610-40-2 规格： 20mg 订购|咨询
异荭草素; Homoorientin CAS号： 4261-42-1 规格： 20mg 订购|咨询
芸苔素内酯;Brassinolide CAS号： 72962-43-7 规格： 20mg 订购|咨询
原薯蓣皂苷;Protodioscin CAS号： 55056-80-9 规格： 20mg 订购|咨询
乙酰黄芪皂苷I;Acetytastrag CAS号： 84687-47-8 规格： 10mg 订购|咨询
盐酸去氢骆驼蓬碱;Harmine Hyd CAS号： 343-27-1 规格： 20mg 订购|咨询
异佛手柑内酯 ;Isobergapten CAS号： 482-48-4 规格： 20mg 订购|咨询
右旋四氢巴马汀 ; D-Tetrahyd CAS号： 3520-14-7 规格： 20mg 订购|咨询
原百部次碱 ;Protostemotin CAS号： 169534-85-4 规格： 10mg 订购|咨询
原百部碱;protostemonine CAS号： 27495-40-5 规格： 20mg 订购|咨询
硬飞燕草碱 ; delsoline CAS号： 509-18-2 规格： 20mg 订购|咨询
8-乙氧基滇乌碱 ;8-O-ethyly CAS号： 70578-24-4 规格： 20mg 订购|咨询
人附睾蛋白4ELISA检测试剂盒真格莫瑞六亚甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；GMS）银染试剂盒 进口/国产 规格：50次
真格兰-韦革氏（Gram-Weigert）染色试剂盒 进口/国产 规格：50次
真天青曙红（Azure-eosinate）染色试剂盒 进口/国产 规格：50次
埃蒙氏（EMMONS）真培养基 进口/国产 规格：100毫升
真/酵母细胞样品细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒 进口/国产 规格：20次
真/酵母细胞线粒体DNA萃取试剂盒 进口/国产 规格：10/20次
真/酵母细胞线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 进口/国产 规格：20次
YPD培养基 进口/国产 规格：500毫升
M9培养基 进口/国产 规格：500毫升
10倍M9培养基 进口/国产 规格：100毫升
BMGY培养基 进口/国产 规格：100/500毫升
BMMY培养基 进口/国产 规格：100/500毫升
活力－死亡真/酵母细胞双重荧光检测试剂盒 进口/国产 规格：50次
酵母/真D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
酵母/真D-葡萄糖含量氧化法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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