人基质金属蛋白酶10ELISA检测试剂盒

组成：
48孔配制：
1.说明书: 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1个
4  酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  产品名称说明书:1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1个
4.  酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。

产品名称：人基质金属蛋白酶10ELISA检测试剂盒
英文名称：matrix metalloproteinase 10

检测范围：62.5pg/mL~2000pg/mL

灵敏度：10

产品货号：BJ-H63952
规格：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温
度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，
直接进入第 5 步封闭。 
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜； 
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育
30 min； 
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37
℃湿盒中孵育 30 min； 
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）； 
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色； 
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明； 
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片； 
17.观察成像： 显微镜下观察成像。 

注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．  如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
东莨菪碱 CAS号： 51-34-3 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

当归酰异五味子素O CAS号： 83864-70-4 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

独活素 CAS号： 2880-49-1 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

大果桉醛B CAS号： 142698-60-0 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

DL-丁香树脂酚 CAS号： 1177-14-6 规格： HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷 CAS号： 26296-54-8 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

麻酰胺 CAS号： 130508-46-2 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

丁香醛 CAS号： 134-96-3 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

对羟基肉桂酸 CAS号： 7400-08-0 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

胆维他 CAS号： 532-11-6 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

达卡巴嗪 CAS号： 891986 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

对甲氧基 CAS号： 123-11-5 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

丁香油 CAS号： 8000-34-8 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

橙皮油内酯 CAS号： 495-02-3 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

苍术酮 CAS号： 6989-21-5 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

赤松素 CAS号： 22139-77-1 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

人基质金属蛋白酶10ELISA检测试剂盒RPMI 1640，干粉

（IVD）    含L-谷氨酰胺，不含碳酸氢钠31800-022

胰蛋白大豆肉汤    无实验中用作冲洗/稀释液（样品含油和卵磷脂）100mL*25

Nutrient agar营养琼脂    1.05450.0500MERCK默克

Agar GASSNER Water-blue metachrome-yellow lactose agar acc.to GASSNER GASSNER 琼脂/水溶蓝偏烙黄乳糖琼脂    1.01282.0500MERCK默克

检定用培养基    250(g)

Fraser肉汤/FB2基础    250(g)

CCDA基础    250(g)

营养肉汤（不含糖）    250(g)

麦康凯琼脂2号         250用于肠道致病的选择性分离、培养(OXOID方法)

麦康凯琼脂 (CM0007)    Oxoid

热灭活马血清    供体动物的EIA检测呈阴性56°下加热30分钟进行热灭活 新西兰

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