人乳酸脱氢酶BELISA检测试剂盒

注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。

产品名称：人乳酸脱氢酶BELISA检测试剂盒
英文名称：Histone

检测范围：0.625ng/mL~20ng/mL

灵敏度：0.1

产品货号：BJ-H68262
规格：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

组成：
48孔配制：
1.说明书: 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1个
4  酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  产品名称说明书:1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1个
4.  酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温
度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，
直接进入第 5 步封闭。 
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜； 
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育
30 min； 
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37
℃湿盒中孵育 30 min； 
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）； 
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色； 
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明； 
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片； 
17.观察成像： 显微镜下观察成像。 

注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．  如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*���的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准
内皮素2，人，犬 Endothelin 2 (human, canine) 123562-20-9 质量规格：>95%,BR  碘成分比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

内皮素3，人，大鼠 Endothelin 3, human, rat 117399-93-6 质量规格：>95%,BR  通用型山梨醇比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

趋嗜曙红细胞肽 Eosinophilotactic Peptide 61756-22-7 质量规格：>95%,BR  饮料山梨醇比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

毒晰外泌肽4 Exendin 4 141758-74-9 质量规格：>95%,BR  口香糖山梨醇比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

血纤肽B，人 Fibrinopeptide B, human 36024-23-6 质量规格：>95%,BR  蜂蜜山梨醇比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

纤维结合素样神经肽；分裂FLRF酰胺 FMRF-like Neuropeptide;Schisto FLRF amide 121801-61-4 质量规格：>95%,BR  血液山梨醇比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：

G-R-G-D-T-P G-R-G-D-T-P 108682-58-2 质量规格：>95%,BR  山梨醇待测样品处理试剂盒 进口/国产 规格：20次

甘丙肽，猪 Galanin, porcine 88813-36-9 质量规格：>95%,BR  通用型总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

甘丙肽，大鼠 Galanin, rat 114547-31-8 质量规格：>95%,BR  细胞总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

甘丙肽(1-13)-神经肽Y(25-36)酰胺(M32) Galanin (1-13)-Neuropeptide Y(25-36), amide (M32) 147138-51-0 质量规格：>95%,BR  组织总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

甘丙肽信号关联肽（1-41）酰胺；Preprogalanin(65-105)酰胺 Galanin Message Associated Peptide (1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide 132699-74-2 质量规格：>95%,BR  体液总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

胃泌素Ⅰ（1-14），人 Gastrin I (1-14) (human) 100940-57-6  质量规格：>95%,BR  植物总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

胃泌素释放肽，人 Gastrin Releasing Peptide,human 93755-85-2 质量规格：>95%,BR  真/酵母总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

胃泌素释放肽，猪 Gastrin Releasing Peptide,procine 74815-57-9 质量规格：>95%,BR  细总巯基含量比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次

人乳酸脱氢酶BELISA检测试剂盒小鼠 SPG21 基因全长ORF克隆Dio3  甲状腺素5'脱碘酶3抗体规格: 0.2ml

小鼠 SSSCA1 基因全长ORF克隆DLK1  穿膜蛋白DLK1抗体规格: 0.1ml

小鼠 FANCL 基因全长ORF克隆DLX4  DLX4抗体规格: 0.2ml

小鼠 CAR3 基因全长ORF克隆DKK1  抑癌蛋白DKK1抗体规格: 0.2ml

小鼠 CAR5A 基因全长ORF克隆DKK3  抑癌蛋白DKK3抗体规格: 0.1ml

小鼠 CPA2 基因全长ORF克隆DMT1  金属离子转运体1抗体规格: 0.1ml

小鼠 BBS1 基因全长ORF克隆DMBT1  抑癌基因抗体规格: 0.1ml

小鼠 BBS4 基因全长ORF克隆MIIP  IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体规格: 0.2ml

小鼠 ANKH 基因全长ORF克隆DNM1L  发动蛋白样相关蛋白1抗体规格: 0.1ml

小鼠 ST6GALNAC2 基因全长ORF克隆DNA PK/PRKDC  DNA依赖性蛋白激酶抗体规格: 0.2ml

小鼠 VCL 基因全长ORF克隆phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2056)  磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体规格: 0.1ml

小鼠 FZD5 基因全长ORF克隆phospho-DNA PK/PRKDC(Thr2609)  磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体规格: 0.1ml

小鼠 CIRH1A 基因全长ORF克隆phospho-DNA PK/PRKDC(Ser2612)  磷酸化DNA依赖性蛋白激酶抗体规格: 0.1ml

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。