操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称:大鼠炎症因子3;穿透素ELISA检测试剂盒
英文名称:fumarase
检测范围:2.5ng/mL~80U/L
灵敏度:0.1
产品货号:BJ-R70130
规格:48T/96T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
组成:
48孔配制:
1.说明书: 1份
2. 封板膜: 2片(48)
3. 密封袋: 1个
4 酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置:
1. 产品名称说明书:1份
2. 封板膜:2片(96)
3. 密封袋: 1个
4. 酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温
度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B���37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育
30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37
℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
四溴双酚A双(2-羟乙基)醚(>93.0%(GC)) Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether 4162-45-2 质量规格:>93.0%(GC) 印迹或沉淀裂解液 进口/国产 规格:用于WESTERN或IP
4,4'-(六氟异亚丙基)二酞酸酐(>98.0%(GC)(T)) 4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride 1107-00-2 质量规格:>98.0%(GC)(T) 变性裂解液 进口/国产 规格: 含有SDS
3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T)) 3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride 2421-28-5 质量规格:>96.0%(T) 进口/国产 规格:
三环[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC)) Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride 738-90-9 质量规格:>98.0%(GC) RIPA基础裂解液 进口/国产 规格: 不含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂
ε-己内酯(>99.0%(GC)) ε-Caprolactone 502-44-3 质量规格:>99.0%(GC) RIPA完全裂解液 进口/国产 规格:含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂
β-丙内酯(>95.0%(GC)(T)) β-Propiolactone 57-57-8 质量规格:>95.0%(GC)(T) 通用型非变性裂解液 进口/国产 规格:适合各种细胞native蛋白
DL-丙交酯(>98.0%(T)) DL-Lactide 95-96-5 质量规格:>98.0%(T) 10X通用型非变性裂解液 进口/国产 规格:适合各种细胞native蛋白
L-(-)-交酯(>98.0%(T)) L-(-)-Lactide 4511-42-6 质量规格:>98.0%(T) 无去垢剂裂解液 进口/国产 规格:用于物理裂解
δ-戊内酯(>98.0%(GC)) δ-Valerolactone 542-28-9 质量规格:>98.0%(GC) 动物样品二维电泳裂解液 进口/国产 规格:用于动物/人体细胞或组织蛋白二维电泳
1,3-双(六氟-α-羟基异丙基)苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene 802-93-7 质量规格:>98.0%(GC) 细样品二维电泳裂解液 进口/国产 规格:用于细蛋白二维电泳
1,4-双(六氟-α-羟基异丙基)苯水合物(>97.0%(GC)) 1,4-Bis(hexafluoro-α-hydroxyisopropyl)benzene Hydrate 1992-15-0 质量规格:>97.0%(GC) 酵母样品二维电泳裂解液 进口/国产 规格:用于酵母蛋白二维电泳
1,10-双[(4-乙氧羰基)苯氧基]癸烷 1,10-Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenoxy]decane 103330-20-7 质量规格: 印迹或沉淀裂解液 进口/国产 规格:用于WESTERN或IP
1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC)) 1,4-Benzenedithiol 624-39-5 质量规格:>98.0%(GC) 变性裂解液 进口/国产 规格: 含有SDS
1,3-双[2-(4-羟苯基)-2-丙基]苯(>98.0%(GC)) 1,3-Bis[2-(4-hydroxyphenyl)-2-propyl]benzene 13595-25-0 质量规格:>98.0%(GC) BLOTTO-10核酸杂交封闭溶液 进口/国产 规格:100毫升
大鼠炎症因子3;穿透素ELISA检测试剂盒小鼠 CCL20 基因全长ORF克隆GRIM19 干扰素/维甲酸诱导凋亡相关基因抗体规格: 0.1ml
小鼠 CCL19 / MIP-3b 基因全长ORF克隆GRM1 促代谢型谷氨酸受体1抗体规格: 0.1ml
小鼠 CCL17 / TARC 基因全长ORF克隆GRM2/GLUR2 促代谢型谷氨酸受体2抗体规格: 0.1ml
小鼠 CD62L / SELL 基因全长ORF克隆Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876) 磷酸化促代谢型谷氨酸受体2抗体规格: 0.1ml
小鼠 ADAM9 基因全长ORF克隆Phospho-GRM2/GLUR2(Tyr876) 磷酸化促代谢型谷氨酸受体2抗体规格: 0.1ml
小鼠 GHR 转录变体1 基因全长ORF克隆GRM3 促代谢型谷氨酸受体M3抗体规格: 0.2ml
小鼠 SPINT2 / HAI-2 基因全长ORF克隆GRM4/mGluR4 促代谢型谷氨酸受体4抗体规格: 0.1ml
小鼠 IGFBP-1 基因全长ORF克隆GRM5/mGluR5 促代谢型谷氨酸受体5抗体规格: 0.1ml
小鼠 IGF-II 基因全长ORF克隆GRM2+GRM4 促代谢型谷氨酸受体2+4抗体规格: 0.2ml
小鼠 Hgfac 基因全长ORF克隆GRO Alpha/GRO-1/CXCL1 生长调节致癌基因-1抗体GROa GROβ规格: 0.1ml
小鼠 HGF 基因全长ORF克隆MIP2/GRO Beta/CXCL2 巨噬 炎症蛋白2( GROβ)抗体规格: 0.1ml
小鼠 bFGF 基因全长ORF克隆GRO gamma/CXCL3 生长调节致癌基因gamma(GROγ)抗体规格: 0.1ml
小鼠 CD16-2 / FCGFR4 基因全长ORF克隆CXCL4/PF4 血小板因子4抗体规格: 0.1ml
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