操作流程: (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 (2)酶标板置4℃,包被过夜。 (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 (6)洗板,同(4)。 (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 (8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 (9)洗板,同(4)。 (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称:精子相关抗原9试剂盒
产品货号:BJ-99972 规格:48T/96T 主要成分:酶标板,试剂,标准品等。 试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。 检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
组成: 48孔配制: 1.说明书: 1份 2. 封板膜: 2片(48) 3. 密封袋: 1个 4 酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存) 5. 标准品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存) 6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存) 7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 9. 显色剂A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 10 .显色剂B液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 11 .终止液:3ml×1瓶(2-8℃保存) 12. 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存) 96孔配置: 1. 产品名称说明书:1份 2. 封板膜:2片(96) 3. 密封袋: 1个 4. 酶标包被板:1×96 (2-8℃保存) 5. 标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存) 6. 标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存) 7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 9. 显色剂A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存) 10. 显色剂B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存) 11. 终止液:3ml×1瓶(2-8℃保存) 12. 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存 实验步骤: 石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr; 2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次 10 min; 3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85% 乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min; 4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温 度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2× 2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复, 直接进入第 5 步封闭。 5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min; 6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜; 7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min; 9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育 30 min; 10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min); 11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min; 12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37 ℃湿盒中孵育 30 min; 13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min); 14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色; 15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明; 16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片; 17.观察成像: 显微镜下观察成像。
乙烯硫脲2-Imidazolidinetione,≥98.0%96-45-725G
丙烯基脲Allyl thiourea,98%109-57-925G
N-苯基脲N-Phenylurea,97%2365825G
盐酸氨基脲Aminourea hydrochloride,≥99%563-41-7100G
四甲基脲Tetramethylurea,99%632-22-450G
丙酮缩氨脲Acetone semicarbazone,97%110-20-325G
二氧化硫脲Thiurea dioxide,≥98%1758-73-2100G
N,N'-二甲基脲N,N′-Dimethylurea,≥99%96-31-1100G
二苯氨基脲Diphenylcarbazide,≥98.0%140-22-75G
硫代氨基脲Thiosemicarbazide,≥99.0%79-19-625G
缩二脲Biuret,98%108-19-010G
精子相关抗原9试剂盒钙结合蛋白 48T/96T
钙腔蛋白 48T/96T
素受体1 48T/96T
糖类抗原125 48T/96T
糖类抗原19-9 48T/96T
碳酸酐酶1 48T/96T
碳酸酐酶2 48T/96T
癌胚抗原 48T/96T
羧甲基赖氨酸 48T/96T
心营养素-1 48T/96T
心营养素样细胞因子1 48T/96T
软骨低聚基质蛋白 48T/96T