ELISA 试验时，注意事项如下：
1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
（1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。
（3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
（4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要**价廉、**、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。
产品名称：紧密连接蛋白试剂盒
产品货号：BJ-99983
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂
性状：液体
产品规格：96T/48T
96T指可以做94个标本，2个标准对照
48T指可以做47个标本，1个标准对照
96T-84个样本
48T-42个样本
待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。
本公司产品仅用于科研实验。
样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内**的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组成结构：
1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内**的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
此IBL试剂盒能用于小鼠血清,EDTA血浆,细胞上清中白介素-6的定量检测
试剂盒成分：
1 预包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 96T
2 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗小鼠白介素-6兔子IgG,亲合纯化 0.4mL x 1
3 标准品: 重组小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA缓冲液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 30mL x 1
5 ��记抗体稀释液: 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 12mL x 1
6 显色剂: TMB底物液 15mL x 1
7 终止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 浓缩洗涤液: (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS 50mL x 1 操作说明 1实验所需器材(但试剂盒没有提供) 酶标仪(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及烧杯 去离子水 冰箱(4°C) 坐标纸(log/log) 吸水纸 试管(用于标准品稀释) 温育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂)
1-对甲基苯磺酰咪唑1-(p-Toluenesulfonyl)imidazole,99%1214825G
1-羟基苯并三唑1-Hydroxybenzotrizole,99%2592-95-225G
1-羟基-7-偶氮苯并...1-Hydroxy-7-azabenzotriazole,99%39968-33-75ML
4,5-二氰基咪唑4,5-Dicyanoimidazole,99.0%1122-28-75G
6-氯-1-羟基苯并三...6-Chloro-1-hydroxibenzotriazol,98%26198-19-625G
N,N'-羰基二(1,2,4-...1,1'-Carbonyl-di-(1,2,4-triazole),≥90%41864-22-61G
N,N'-羰基二咪唑N,N'-Carbonyldiimidazole,≥97.0%530-62-125G
苯并咪唑Benzimidazole,98%51-17-225G
1-甲基咪唑1-Methylimidazole,99%616-47-7100G
6-硝基苯并咪唑6-Nitrobenzimidazole,98%94-52-025G
3-氨基吡唑3-Aminopyrazole,98%1820-80-01G
吡唑Pyrazole,98%288-13-125G
紧密连接蛋白试剂盒细胞角质素片段抗原21.1 48T/96T
核心蛋白聚糖 48T/96T
抑癌蛋白DKK1 48T/96T
抑癌蛋白DKK3 48T/96T
脱氢血栓素B2 48T/96T
2,3二磷酸甘油酸 48T/96T
D二聚体 48T/96T
树突状细胞相关C型凝集素-1 48T/96T
防御素5 48T/96T
二氢二醇脱氢酶 48T/96T
多巴胺 48T/96T
强啡肽 48T/96T
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