注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称：基质金属蛋白酶13试剂盒
产品货号：BJ-100050 规格：48T/96T 主要成分：酶标板,试剂,标准品等。 试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。 检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
组成： 48孔配制： 1.说明书: 1份 2. 封板膜: 2片（48） 3. 密封袋: 1个 4 酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存) 5. 标准品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存) 6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存) 7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 10 .显色剂B液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存) 12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存) 96孔配置： 1. 产品名称说明书:1份 2. 封板膜:2片（96） 3. 密封袋: 1个 4. 酶标包被板:1×96 (2-8℃保存) 5. 标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存) 6. 标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存) 7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存) 9. 显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存) 10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存) 11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存) 12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存 实验步骤: 石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr； 2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次 10 min； 3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85% 乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min； 4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温 度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2× 2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复， 直接进入第 5 步封闭。 5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min； 6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜； 7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min； 9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育 30 min； 10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min； 12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37 ℃湿盒中孵育 30 min； 13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）； 14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色； 15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明； 16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片； 17.观察成像： 显微镜下观察成像。 注意事项: 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B��避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准 乙酸钠三水Sodium acetate trihydrate,≥99.0%6131-90-4250G
黑芥子硫苷酸钾水合物Sinigrin Hydrate3952-98-550MG
(溴甲基)三氟硼酸钾Potassium (bromomethyl)trifluoroborate...888711-44-21G
磷酸烯醇式丙酮酸钾Phospho(enol)pyruvic acid monopotassiu...4265-07-0250MG
过氧化钾Potassium dioxide12030-88-550G
偏钒酸钾Potassium metavanadate,98%13769-43-210G
青霉素钾Penicillin G potassium salt (suitable ...113-98-425G
过硫酸氢钾Potassium monopersulfate triple salt,...70693-62-8100G
氯铑酸钾Potassium trifluoromethanesulfonate,98%2926-27-45G
四溴钯酸钾Potassium tetrabromopalladate13826-93-21G
氯甲基基硅烷(Chloromethyl)trimethylsilane,98%2344-80-15ML
氟钽酸钾Potassium heptafluorotantalate(V),99%16924-00-810G
基质金属蛋白酶13试剂盒E-选择素 48T/96T
L-选择素 48T/96T
P-选择素 48T/96T
五羟色胺 48T/96T
分泌型白细胞蛋白酶抑制物 48T/96T
P物质 48T/96T
生存素 48T/96T
平滑肌肌动蛋白 48T/96T
富含半胱氨酸型酸性蛋白1 48T/96T
音猬因子 48T/96T
SMAD2/3抗体 48T/96T
SMAD1 48T/96T
操作流程： （1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 （2）酶标板置4℃，包被过夜。 （3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 （4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 （5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 （6）洗板，同（4）。 （7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 （8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 （9）洗板，同（4）。 （10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 （11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 （12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 （13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。