注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称：混合功能氧化酶试剂盒
产品货号：BJ-100074
规格：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
组成：
48孔配制：
1.说明书: 1份
2. 封板膜: 2片（48）
3. 密封袋: 1个
4 酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1. 产品名称说明书:1份
2. 封板膜:2片（96）
3. 密封袋: 1个
4. 酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr；
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min；
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温
度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，
直接进入第 5 步封闭。
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜；
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育
30 min；
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37
℃湿盒中孵育 30 min；
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）；
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色；
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
17.观察成像： 显微镜下观察成像。
注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作��行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准
氢氧化铋Bismuth hydroxide10361-43-025G
碘化铋Bismuth iodide7787-64-625G
硝酸铋(III) 五水合物Bismuth nitrate pentahydrate, ≥98.0%10035-06-0100G
硫酸铋Bismuth sulfate, ≥99.0%7787-68-0100G
次硝酸铋Bismuth subnitrate,≥ 99.5 %10361-46-3100G
次碳酸铋Bismuth(III) carbonate basicG
锆酸锶Strontium zirconate12036-39-4250G
溴化锶Strontium bromide hexahydrate7789-53-925G
氟化锶Strontium fluoride7783-48-410G
氧化锶Strontium oxide,≥97.0%1314-11-0100G
氢氧化锶Strontium hydroxide1311-10-025G
碳酸锶Strontium Carbonate,≥99.95%1633-05-225G
混合功能氧化酶试剂盒Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/RBITC 罗丹明标记的兔抗人IgG F(ab')2 规格: 0.1mlPhospho-MAPKAPK2(Thr334) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 规格: 0.1ml
PHGDH 磷酸甘油酸脱酶抗体 0.2mlphospho-GABBR2 (Ser892) 磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体 规格: 0.1ml
NLRP10 富含亮氨酸重复结构域蛋白10抗体 规格: 0.2mlRNF170 环指蛋白170抗体 规格: 0.2ml
CCL12/MCP5 单核细胞趋化蛋白5抗体 规格: 0.2mlWNK3 protein 丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK3抗体 规格: 0.1ml
phospho-Histone H1.4(Thr18) 磷酸化组蛋白H1.4抗体 规格: 0.1mlPlastin L 细胞胞浆蛋白LCP1抗体 规格: 0.2ml
TM7SF2/DHCR14A 脱胆固醇还原酶14抗体 规格: 0.2mlPKA R2/PKA IIα 蛋白激酶A受体2α亚基抗体 规格: 0.2ml
Cyclin A1 周期素A1蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-FANCD2(Ser222) 磷酸化FANCD2抗体 规格: 0.1ml
SHFM3 SHFM3蛋白抗体 规格: 0.2mlKCNG4/KV6.3 钾离子通道蛋白G蛋白4抗体 规格: 0.2ml
phospho-MAP4(Ser941) 磷酸化微管相关蛋白4抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-dog IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗狗IgG 规格: 0.1ml
NAT10 乙酰基转移酶10抗体 规格: 0.2mlphospho-Alpha synuclein(Ser129) 磷酸化核突触蛋白α抗体 规格: 0.1ml
Phospho-LKB1(Thr189) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抗体 规格: 0.1mlRabbit anti-Goat IgG whole serum 兔抗羊IgG抗清 规格: 1ml
bFGFR/FGFR1 碱性成纤维细胞生因子受体1抗体 规格: 0.1mlPancreatic Amylase 胰淀粉酶抗体 规格: 0.1ml
HHEX/HMPH 同源盒蛋白PRH抗体 规格: 0.1mlGDF15/MIC-1 生分化因子15/巨嗜细胞抑制因子1抗体 规格: 0.1ml
IL5RA/CD125 白介素-5受体α链抗体IL-5Rα 规格: 0.1mlphospho-MEF2C(Ser387) 磷酸化肌细胞增强因子2C抗体 规格: 0.1ml
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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