注:本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。
产品名称:草酸试剂盒
产品货号:BJ-100308
规格:48T/96T
主要成分:酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属:马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
组成:
48孔配制:
1.说明书: 1份
2. 封板膜: 2片(48)
3. 密封袋: 1个
4 酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品: 0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置:
1. 产品名称说明书:1份
2. 封板膜:2片(96)
3. 密封袋: 1个
4. 酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5. 标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液:3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液:3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(2-8℃保存
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温
度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,
直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育
30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37
℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混��。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准
3-乙炔苯胺3-Ethynylaniline,≥98%54060-30-95G
胡黄连苷 IIPicroside II (≥98%,HPLC)39012-20-920MG
胡黄连苷 IIIPicroside III (≥98%,HPLC)64461-95-620MG
(+)-儿茶素(+)-Catechin hydrate (≥98%,HPLC)225937-10-020MG
表没食子儿茶素没食...EGCG (≥98%.HPLC)989-51-520MG
表儿茶素没食子酸酯ECG (≥98%,HPLC)1257-08-520MG
银杏内酯AGinkgolide A (≥98%,HPLC)15291-75-520MG
银杏内酯BGinkgolide B (≥98%,HPLC)15291-77-720MG
银杏内酯CGinkgolide C (≥98%,HPLC)15291-76-620MG
2-甲基-3-三氟甲基...2-Methyl-3-(trifluoromethyl)aniline,95%54396-44-01G
乙酰金刚烷胺N-(1-Adamantyl)acetamide,98%880-52-410G
4-甲基乙酰苯胺4′-Methylacetanilide,99%103-89-925G
草酸试剂盒Adiponectin receptor 2 脂联素受体2抗体 规格: 0.1mlARIP2B 激活素受体2B抗体 规格: 0.2ml
Periostin 成骨细胞特异性因子2抗体 规格: 0.2mlRabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗爪沙鼠IgG 规格: 0.1ml
CD8 alpha CD8抗体 0.1mlBAI1 脑特异性管**抑制蛋白1抗体 规格: 0.2ml
AF 4 protein 原基因AF4蛋白抗体 规格: 0.2mlVHL/HRCA1 脑视网膜管瘤G7蛋白抗体(逢希伯-林道氏病) 规格: 0.1ml
phospho-MEF2C(Ser59) 磷酸化肌细胞增强因子2C抗体 规格: 0.1mlPhospho-MKP1 (Ser318) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗体 0.1ml
DUT 脱氧尿苷三磷酸酶DUT抗体 规格: 0.1mlLck/p56-LCK 细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体 规格: 0.2ml
ABCF3 三磷酸苷结合盒转运蛋白F亚基3抗体 规格: 0.2mlDHRS13 短链脱还原酶13抗体 规格: 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG/APC APC标记的驴抗兔IgG 规格: 0.1mlGoat Anti-human IgM/RBITC 罗丹明标记的羊抗人IgM 规格: 0.3ml
SPHK1 鞘氨醇激酶1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Goat IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗羊IgM 规格: 0.1ml
GIPC-2 胞浆区相关蛋白GIPC2抗体 规格: 0.2mlphospho-Tau protein(Ser422) 磷酸化微管相关蛋白抗体 规格: 0.1ml
MYH7 肌球蛋白重链7抗体 规格: 0.2mlCullin 5/CUL5 管加压素激活钙启动受体蛋白1抗体 规格: 0.2ml
UQCRFS1 质子梯度调节蛋白1抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-rat IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗大鼠IgM 规格: 0.1ml
FAM153B FAM153B蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-BACH1/BRIP1(Ser990) 磷酸化易感基因相互作用蛋白1抗体 规格: 0.1ml
PAX8 配对盒基因8抗体 规格: 0.1mlPhospho-SHIP1 (Tyr1020) 磷酸化SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体 规格: 0.1ml
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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