相对定量分析方法 ： 2-ΔΔCt 前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内 1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值： ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值： ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator） 3、计算表达水平比率： 2 –ΔΔCT=表达量的比值 参数规格：
产品名称：荧光定量PCR试剂盒 货号：BJ-205572
使用方法:
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例） 1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。 2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。 3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。 4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。 5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。 6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。 7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
具有下列特点： 1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。 2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级，可以达到几百拷贝/反应。 3.即开即用，用户只需要提供样品模板，操作简单，定量准确快速。 4.一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。 5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。 6.本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。 需要自备的器材： 1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。 2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的**离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、**双蒸水。
苯扎贝特（标准品） Bezafibrate 41859-67-0 质量规格：HPLC>98%,标准品 布南色林 Blonanserin 132810-10-7 质量规格：>99% 溴夫定 Brivudine 69304-47-8 质量规格：纯度≥99.0%，含量≥98.5% 溴夫定(标准品) Brivudine 69304-47-8 质量规格：HPLC≥98%,标准品 卡巴他赛 Cabazitaxel 183133-96-2 质量规格：≥99% 米托蒽醌 Mitoxantrone 65271-80-9 质量规格：HPLC>97%,BR 拉莫三嗪 Lamotrigine 84057-84-1 质量规格：>98%,BR 拉莫三嗪 （标准品） Lamotrigine 84057-84-1 质量规格：HPLC>98%,标准品 D-半乳糖醛酸 D-Galacturonic acid 91510-62-2 质量规格：进分,97%,一水 D-半乳糖醛酸(标准品) D-Galacturonic acid 91510-62-2 质量规格：UV法含量测定；一水物 骨化三醇 Calcitriol 32222-06-3 质量规格：纯度≥98%,BR 坎地沙坦酯 Candesartan cilexetil 145040-37-5 质量规格：>99%,BR,可用于 培养 坎地沙坦酯(标准品) Candesartan cilexetil 145040-37-5 质量规格：HPLC>98%，标准品 卡奈替尼 Canertinib 267243-28-7 质量规格：>98%,BR GEMSA 2-Guanidinoethylmercaptosuccinic Acid 77482-44-1 质量规格：进口原装Santa,99% 枸橼酸喷托维林/托可拉斯/妥克拉司 Carbetapentane citrate/Pentoxyverine citrate 23142-01-0 质量规格：含量98.0%~100.5% 卡洛芬 Carprofen 53716-49-7 质量规格：>99% 卡洛芬（标准品） Carprofen 53716-49-7 质量规格：HPLC>98%,标准品 长春质碱(标准品) Catharanthine 2468-21-5 质量规格：>98%，分析标准品 阿苯达唑(标准品) Albendazole 54965-21-8 质量规格：>98%,标准品 阿苯达唑 Albendazole 54965-21-8 质量规格：>98%,BR 西立伐他汀钠 Cerivastatin sodium 143201-11-0 质量规格：BR 西替利嗪 Cetirizine 2HCl 83881-52-1 质量规格：>98%，进口分装植物超氧化物歧化酶（SOD）亚型制备试剂盒 进口/国产 规格： 50次 超氧化物歧化酶（SOD）酵母/**裂解样品制备试剂盒 进口/国产 规格： 50次 酵母/**超氧化物歧化酶（SOD）亚型制备试剂盒 进口/国产 规格： 50次 超氧化物歧化酶（SOD）**裂解样品制备试剂盒 进口/国产 规格： 50次 **超氧化物歧化酶（SOD）亚型制备试剂盒 进口/国产 规格： 50次 动物 /组织胞浆超氧化物歧化酶（Cu/Zn SOD）分离试剂盒 进口/国产 规格：50次 植物组织胞浆超氧化物歧化酶（Cu/Zn SOD）分离试剂盒 进口/国产 规格：50次 动物 /组织线粒体超氧化物歧化酶（Mn/Fe SOD）分离试剂盒 进口/国产 规格：50次 植物组织线粒体超氧化物歧化酶（Mn/Fe SOD）分离试剂盒 进口/国产 规格：50次 超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒（附标准样） 进口/国产 规格：50次 超氧化物歧化酶（SOD）标准曲线测定试剂盒 进口/国产 规格：5次 内氧化应激活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：20次 内氧化应激活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：100次 荧光定量PCR试剂盒活体组织氧化应激活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：8/20次 活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：40/100次 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：50次 冰冻切片氧化应激活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：50次 **/酵母 内氧化应激活性氧（ROS）高质绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：20次 **/酵母 内氧化应激活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：50次 植物 内氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：20次 植物 内氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂盒 进口/国产 规格：50次
注意事项： 1. 建议使用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。 2. 试剂Buffer AL若低温保存，易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀，混匀后再使用。 3. 电泳检测时，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则，电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。 4. 建议扩增片段长度1 kb以内，以便扩增效率佳。 ?5. 为了您的**和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。