相对定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目标序列和内参序列的扩增效率接近100%且偏差在5%以内 1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、计算表达水平比率: 2 –ΔΔCT=表达量的比值 参数规格:
产品名称:PCR定量试剂盒 货号:BJ-205576
使用方法:
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例) 1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 段作为阳性对照。 2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。 3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液(用带芯枪头,下同)。 4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。 5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。 6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。 7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
具有下列特点: 1.根据 指标的保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。 2.灵敏度比常规 PCR 高 2-3 个数量级,可以达到几百拷贝/反应。 3.即开即用,用户只需要提供样品模板,操作简单,定量准确快速。 4.一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。 5.本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。 6.本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。 需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的**离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、**双蒸水。
酮咯酸氨丁三醇 Ketorolac Tromethamine 74103-07-4 质量规格:>98.5%,USP,BR 酮咯酸氨丁三醇(标准品) Ketorolac Tromethamine 74103-07-4 质量规格:HPLC>98%,标准品 兰索拉唑 Lansoprazole 103577-45-3 质量规格:干品含量>98%,USP32 兰索拉唑(标准品) Lansoprazole 103577-45-3 质量规格:HPLC>98%,标准品 拉帕替尼 Lapatinib base 231277-92-2 质量规格:>98.5%,可用于 培养 左炔诺孕酮 Levonorgestrel 797-63-7 质量规格:>98%,USP33,可用于 培养 左炔诺孕酮(标准品) Levonorgestrel 797-63-7 质量规格:HPLC>98%,标准品 舒必利(标准品) Levosulpiride 23672-07-3 质量规格:>98%,标准品 舒必利 Levosulpiride 23672-07-3 质量规格:>98%,BR L-甲状腺素钠;四碘代甲状腺素钠盐,T4 Levothyroxine Sodium 25416-65-3 质量规格:>98.5%,BR 利多卡因 Lidocaine 137-58-6 质量规格:>98.5% 利多卡因(标准品) Lidocaine 137-58-6 质量规格:含量测定 盐酸利多卡因 Lidocaine HCl 6108-05-0 质量规格:>99%,AR 盐酸利多卡因(标准品) Lidocaine HCl 6108-05-0 质量规格:含量测定 赖诺普利 Lisinopril Dihydrate 83915-83-7 质量规格:>98%,二水合物可用于 培养 赖诺普利(标准品) Lisinopril Dihydrate 83915-83-7 质量规格:含量测定 盐酸洛贝林 Lobeline Hydrochloride 134-63-4 质量规格:>98%,进分 氯尼达明 Lonidamine 50264-69-2 质量规格:>99%,BR 洛匹那韦 Lopinavir 192725-17-0 质量规格:>99% 洛匹那韦(标准品) Lopinavir 192725-17-0 质量规格:HPLC>98%,标准品 氯雷他定 Loratadine 79794-75-5 质量规格:>99% 氯雷他定(标准品) Loratadine 79794-75-5 质量规格:>99%,标准品 褪黑素,松果体素 Melatonine 73-31-4 质量规格:>99%,BR膜电位依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 进口/国产 规格:20次 呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 进口/国产 规格:20次 活体 线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒 进口/国产 规格:20/400次 超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 组织超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 血液超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 PCR定量试剂盒体液超氧化物阴离子比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 组织超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 血液超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 体液超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 组织超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 血液超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 体液超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次 体内(in vivo)超氧化物阴离子荧光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
注意事项: 1. 建议使用新鲜采取的动物组织,若为长期冷冻组织,应尽量避免反复冻融,否则会导致模板的降解,影响PCR效率。 2. 试剂Buffer AL若低温保存,易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间,也可在37℃水浴中预热10 min,以溶解沉淀,混匀后再使用。 3. 电泳检测时,切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否则,电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带,影响实验结果。 4. 建议扩增片段长度1 kb以内,以便扩增效率佳。 ?5. 为了您的**和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作