大鼠肿瘤坏死因子αELISA检测试剂盒

操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。本公司产品仅用于科研实验。

产品名称：大鼠肿瘤坏死因子αELISA检测试剂盒
英文名称：CA724

检测范围：0.5ng/mL~16U/mL

灵敏度：0.1

产品货号：BJ-R70230
规格：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

组成：
48孔配制：
1.说明书: 1份
2. 封板膜:  2片（48）
3. 密封袋:  1个
4  酶标包被板: 1×48 (2-8℃保存)
5. 标准品:    0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6. 标准品稀释液: 1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7. 酶标试剂:     3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8. 样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9. 显色剂A液： 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10 .显色剂B液：  3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11 .终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存)
96孔配置：
1.  产品名称说明书:1份
2.  封板膜:2片（96）
3.  密封袋: 1个
4.  酶标包被板:1×96 (2-8℃保存)
5.  标准品:0.5ml×1瓶(2-8℃保存)
6.  标准品稀释液:1.5ml×1瓶(2-8℃保存)
7.  酶标试剂: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
8.  样品稀释液: 3 ml×1瓶(2-8℃保存)
9.  显色剂A液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
10. 显色剂B液：3 ml×1瓶(2-8℃保存)
11. 终止液：3ml×1瓶(2-8℃保存)
12. 浓缩洗涤液：（20ml×20倍）×1瓶(2-8℃保存
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度 
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr； 
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次
10 min； 
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%
乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min； 
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温
度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×
2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，
直接进入第 5 步封闭。 
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min； 
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜； 
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min； 
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育
30 min； 
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）； 
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min； 
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37
℃湿盒中孵育 30 min； 
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）； 
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色； 
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明； 
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片； 
17.观察成像： 显微镜下观察成像。 

注意事项:
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．  如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先将样本稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数（×5×n）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准
25-脱乙酰基利福平 25-Desacetyl Rifampicin 16783-99-6 质量规格：美国进口  

N-去甲基利福平 N-Demethyl Rifampin 13292-45-0 质量规格：美国进口  

去甲基波生坦 Desmethyl Bosentan 253688-61-8 质量规格：美国进口  

羟基去甲基波生坦 Hydroxy Desmethyl Bosentan 253688-62-9 质量规格：美国进口  

波生坦 Bosentan 147536-97-8 质量规格：美国进口  

羟基波生坦 Hydroxy Bosentan 253688-60-7 质量规格：美国进口  

盐酸普拉格雷 Prasugrel Hydrochloride 389574-19-0 质量规格：美国进口  

4-羟基可乐定-d4 4-Hydroxy Clonidine-d4 57101-48-1 (unlabeled) 质量规格：美国进口  

4-羟基可乐定 4-Hydroxy Clonidine 57101-48-1 质量规格：美国进口  

5-去亚硫酰-5-硫基头孢哌酮 5-Desthiolyl-5-thioxo Cefoperazone 711598-76-4 质量规格：美国进口  

Fmoc-N-苄基甘氨酸 Fmoc-N-benzylglycine 141743-13-7 质量规格：美国进口  

N-苄基甘氨酸盐酸盐 N-Benzylglycine hydrochloride 7689-50-1 质量规格：美国进口  

N-苄基甘氨酸乙酯 N-Benzylglycine ethyl ester 6436-90-4 质量规格：美国进口  

氨基扎那米韦 Zanamivir Amine 130525-62-1 质量规格：美国进口  

大鼠肿瘤坏死因子αELISA检测试剂盒大鼠 PRNP 基因全长ORF克隆Nectin 3/CD113    粘附分子3抗体（脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白3）规格: 0.1ml

大鼠 NCR1 基因全长ORF克隆Nestin  巢蛋白/神经上皮干  蛋白抗体规格: 0.1ml

大鼠 FZD4 基因全长ORF克隆Nestin  巢蛋白/神经上皮干  蛋白抗体规格: 0.1ml

大鼠 JAM2 基因全长ORF克隆Neurobeachin  蛋白激酶锚定蛋白抗体规格: 0.2ml

大鼠 CD320 基因全长ORF克隆AKAP95/AKAP8  蛋白激酶A锚定蛋白95抗体规格: 0.1ml

大鼠 CD5 基因全长ORF克隆NeuN  神经元核抗原抗体规格: 0.1ml

大鼠 GYPC 基因全长ORF克隆Nrn1/Cpg15/Neuritin  转化神经突起蛋白抗体规格: 0.2ml

大鼠 MRC1 基因全长ORF克隆Neurocan  神经粘蛋白抗体规格: 0.1ml

大鼠 KLRC1 基因全长ORF克隆NGB/neuroglobin  脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体规格: 0.1ml

大鼠 LAG3 基因全长ORF克隆NeuroD1/NEUROD  神经  分化因子1抗体规格: 0.1ml

大鼠 IFITM1 基因全长ORF克隆Neurofascin/Nfasc155  神经束蛋白155抗体规格: 0.2ml

大鼠 GGT1 基因全长ORF克隆Neurogenin 2/NGN2  神经元素2抗体规格: 0.1ml

大鼠 MSR1 基因全长ORF克隆NT/NTS1/NTRH  神经降压素抗体规格: 0.1ml