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产品资料

肺癌细胞株;MSTO-211H

肺癌细胞株;MSTO-211H
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  • 产品名称:肺癌细胞株;MSTO-211H
  • 产品型号:BJ-01X8556
  • 产品展商:邦景
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简单介绍
肺癌细胞株;MSTO-211H现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供肺癌细胞株;MSTO-211H价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
产品描述

我司全程提供细胞生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、组织、冻存条件等复苏及冻存细胞株说明书信息,我们专业您的细胞系实验,让您实验再无烦扰!

英文简称:MSTO-211H细胞

产品名称:肺癌细胞株;MSTO-211H

货号:BJ-01X8556

规格:T25

形态特性:成纤维细胞样

生长特性:贴壁生长

特征特性:MSTO-211H细胞株是1985年从一位肺二相间皮瘤患者的胸水中建株的。这个病人接受过多种**联合前期化疗。MSTO-211H细胞具有高亲和力的EGF结合位点,并表达神经元特异性烯醇酶(NSE)及人绒毛膜促性腺**(HCG)的α与β亚基。未检测到多巴胺脱羧酶(DDC),邦巴辛与神经tensin。细胞过表达CS-myc原癌基因,并没

细胞传代步骤: 
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


实验要点及说明 :

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 

2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理; 

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

培养操作:

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。


使用方法:

收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;

4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

ATAD5  染色体脆弱性相关基因抗体规格: 0.2ml

BAT3/BAG6  Bcl2相关抗凋亡基因6抗体规格: 0.2ml

CTNNBL1/Beta catenin like 1  β连环蛋白样蛋白1抗体规格: 0.2ml

DATF1  死亡相关转录因子1抗体规格: 0.2ml

TFDP2/DP2  转录因子E2F二聚体蛋白2抗体规格: 0.2ml

EAF2  睾酮调节  凋亡诱导和肿瘤抑制基因抗体规格: 0.2ml

FLI1  尤文肉瘤FLI1蛋白抗体规格: 0.2ml

MDMX  MDM2样P53蛋白结合抗体规格: 0.2ml

TMUB1  跨膜和泛素样结构域蛋白1抗体规格: 0.2ml

NUP50  核孔蛋白50抗体规格: 0.2ml

PDCD2L/MGC13096  程序性  死亡2抗体规格: 0.2ml

SLTM  转绿调节因子SLTM抗体规格: 0.2ml

GPR65  G蛋白偶联受体65抗体规格: 0.2ml

肺癌细胞株;MSTO-211H粘酸 Mucic acid 526-99-8 20mg

DHL琼脂(胆硫乳琼脂) 用于肠道致病特别是沙门氏和志贺氏的选择性分离培养(GB/T4789.28-2003 中4.20,GB/T478... 250g

10000U 核糖核酸酶RNase If RNase If  -20℃保存

5g 邻苯二胺 OPD (O-Phenylenediamine) -20℃避光保存

10mL RNA洗脱液 RNA Elution Buffer 常温

1g 分子生物学级糖原干粉 Glycogen Powder 常温

甜叶悬钩子苷 Rubusoside 64849-39-4  10mg

10g D- 氨基葡萄糖盐酸盐 D-Glucosamine Hydrochloride  室温干燥保存

阿多尼弗林碱 Adonifoline 甲酸溶液 100mg

2 ug pGL2-control pGL2-control 低温运输,-20℃保存

250mL Succinate Buffer(琥珀酸缓冲液),0.2M,pH6.0   Succinate Buffer,0.2M,pH6.0   常温保存

5mL dNTP溶液,100 mM dNTP Solution,100 mM -20℃保存

1g 苦杏仁苷 Amygdalin 常温保存

 

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