使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。
订购信息：
产品名称：艾美耳球虫属通用PCR实验试剂
英文名称：Eimeria spp.PCR
货号：BJ-01R3569
产品规格：50T
运输：低温
保存：负20度
有效期：一年
货期：现货
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】：
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
u 运输：采用**或泡沫箱加冰密封进行运输。
本公司产品仅用于科研。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。
组成及试剂配制:
1、 酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的**量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
Tesevatinib (XL-647) 10mg 3b-Hydroxy-5-cholenoic acid 1mg N-ArachidonylGABA 1mg
13(Z)-Docosenoic Acid 1mg BRL 50481 5mg D-myo-Inositol-1,5,6-triphosphate (sodium salt) 100g
17(S)-HDHA-d5 25μg Sulforhodamine B sodium salt (Acid Red 52) 100mg EPPTB 50mg
Davercin 1μg N-hexadecanoyl-L-Homoserine lactone 100mg N-Acetyltryptamine 25g
Artemitin 100mg DBCO-PEG6-amine 1μg IL-2 Canine 100mg
11-deoxy Prostaglandin F2β 10mM*1mLinDMSO (R)-VU 6008667 10mg Gliadin Alpha Wheat 100mg
AX20017 10mg (Ser(Ac)??D-Ser(tBu)??Azagly1??-LHRH 100mg 1-Palmitoyl-2-Stearoyl-3-Butyryl-rac-glycerol 1mg
TPA 023 20mg MNITMT 5mg IL 8 Porcine 500μg
N-undecanoyl-L-Homoserine lactone 5mg Z-VAD(OH)-FMK 1mg Protein A, 434 a.a 10mg
H-D-Arg(Pbf)-OH 10mg Galanin (1-13)-Neuropeptide Y (25-36) amide 50mg STC 1 Human 50mg
Tipiracil 250mg BS-181 HCl 100mg RAB3IL1 Human 1mg
5-Tricosylresorcinol 50mg Succinyl-(Pro??,D-Glu??)-Hirudin (56-65) (sulfated) 100mg PHA-767491 hydrochloride 50mg
Deracoxib 50μg Ethinyl Estradiol 1mg Amlodipine maleate 50mg
JWH 018 N-(1,2-dimethylpropyl) isomer 10mg A-796260 Degradant 10μg PF-00356231 hydrochloride 1mg
NANOGP8 Human 10mg Cinacalcet metabolite M4 1μg Boc-Glu-Lys-Lys-AMC 1mg
艾美耳球虫属通用PCR实验试剂 皮蝇磷 标准品 CAS号：299-84-3 250mg 英文名称 含量： 20mg/支 C6orf58 6号染色体开放阅读框58抗体规格: 0.2ml
环酰 胺 标准品 CAS号：126833-17-8 100mg 英文名称 含量： 20mg/支 Orai2 跨膜蛋白Orai2抗体规格: 0.2ml
杀螟硫磷 标准品 CAS号：122-14-5 250mg 英文名称 含量： 20mg/支 BAAT1/C7orf27 7号染色体开放阅读框27抗体规格: 0.2ml
仲丁威 标准品 CAS号：3766-81-2 250mg 英文名称 含量： 20mg/支 CCZ1 CCZ1蛋白抗体规格: 0.2ml
2,4,5滴丙酸（2，4，5-TP） 标准品 CAS号：93-72-1 250mg 英文名称 含量： 20mg/支 MMS21/NSE2 E3连接酶MMS21蛋白抗体规格: 0.2ml
苯硫威 标准品 CAS号：62850-32-2 100mg 英文名称 含量： 20mg/支 C9orf86 9号染色体开放阅读框86抗体规格: 0.2ml
恶唑禾草灵 66441-23-4 100mg 英文名称 含量： 20mg/支 FIBCD1 含纤维蛋白原C结构域蛋白1抗体规格: 0.2ml
双氧威 标准品 CAS号72490-01-8 250mg 英文名称 含量： 20mg/支 PGGT1A/FNTA 蛋白香叶烯基转移酶1α抗体规格: 0.2ml
甲氰菊酯标准品 CAS号： 39515-41-8 250mg 英文名称 含量： 20mg/支 PGGT1B/FNTB 蛋白香叶烯基转移酶1β（FTβ）抗体规格: 0.2ml
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