生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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线粒体活性氧产生速率(ROS)生化试剂盒(荧光法)
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荧光法
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100管/96样
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BJ-0161151-100管/96样
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商品介绍:
测定意义:
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多,就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸,使机体出现氧化应激,同时,活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤,导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。
因此,通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。
测定原理:
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFH,DCFH迅速与ROS反应**荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品:
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
BDP5290 ROCK和MRCK抑制剂(BDP5290) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Wortmannin PI3K和MLCK活性抑制剂(Wortmannin) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
GSK 650394 SGK抑制剂(GSK 650394) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
LLY-507 SMYD2抑制剂(LLY-507) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
Luxol Fast Blue染色液 50ml
Edoxaban tosylate monohydrate FXa抑制剂(Edoxaban tosylate monohydrate) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH-辅酶Q还原酶测试盒(紫外分光光度法) 25管/24样
Mogrol ERK1/2和STAT3信号通路抑制剂(Mogrol) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
GSK137647A FFA4激动剂(GSK137647A) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
GNE-7915 LRRK2抑制剂(GNE-7915) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
NBD-557 HIV-1抑制剂(NBD-557) 1mL(10mM)|5mg|10mg
Simvastatin HMG-CoA reductase抑制剂 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
Lomeguatrib MGMT抑制剂(Lomeguatrib) 1mL(10mM)|10mg|50mg
UMI-77 Mcl-1SMI抑制剂(UMI-77) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
线粒体活性氧产生速率(ROS)生化试剂盒(荧光法)大鼠嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 环腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)重组蛋白Recombinant Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH)
人C4结合蛋白(C4BP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 环氧化合物水解酶4(EPHX4)重组蛋白Recombinant Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4)
人胶原吡啶交联(PYD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)重组蛋白Recombinant Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal (FABP6)
人维生素E(VE)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)重组蛋白Recombinant Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)
小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌红蛋白(MYO)重组蛋白Recombinant Myoglobin (MYO)
人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌肌酸激酶(CKM)重组蛋白Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)
人基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌球蛋白轻链1(MYL1)重组蛋白Recombinant Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal (MYL1)
人生长**释放因子(GH-RF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌球蛋白轻链2(MYL2)重组蛋白Recombinant Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac (MYL2)
兔子白介素10(IL-10)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌球蛋白轻链激酶(MYLK)重组蛋白Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)
大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌球蛋白重链2(MYH2)重组蛋白Recombinant Myosin Heavy Chain 2, Skeletal Muscle, Adult (MYH2)
小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 肌球蛋白重链1(MYH1)重组蛋白Recombinant Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1)
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