操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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谷氨酸合成酶(GOGAT)生化试剂盒(微量法)
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微量法
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100管/96样
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BJ-0161190-100管/96样
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商品介绍:
测定意义:
GOGAT广泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环,参与氨同化的调控。GOGAT分为以NADH为还原剂的NADH-GOGAT和以铁氧还蛋白为还原剂的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT主要存在于叶绿体基质中,与光合作用和光呼吸有关,主要同化NO3-还原和光呼吸产生的NH4+。
测定原理:
Fd-GOGAT催化谷氨酰胺的氨基转移到α-酮戊二酸,形成两分子的谷氨酸,谷氨酸脱氢酶催化谷氨酸的脱氢反应,同时产生NADH,使WST-8显橙黄色,在450 nm下测定吸光值。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
土壤漆酶测试盒(微量法) 100管/48样
Eosin Staining Solution 伊红染色液 100ml
Abacavir sulfate 逆转录酶抑制剂(Abacavir sulfate) 1mL(10mM)|10mg|50mg
K-Ras-IN-1 K-ras抑制剂(K-Ras-IN-1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Bitopertin glycine reuptake抑制剂(Bitopertin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
CAY10603 HDAC6抑制剂(CAY10603) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
尿酸(UA)含量测试盒(可见分光光度法) 50管/48样
ML-098 GTP结合蛋白Rab7激活剂(ML-098) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
AVL-292 Btk激酶活性抑制剂(AVL-292) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Hydroxyl Free Radical assay kit 羟自由基测试试剂盒 50管/48样
Estramustine phosphate sodium Estramustine phosphate sodium 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Double chromogenic Immunofluorescence kit for rat IgG(Cy3&POD) 双显色抗大鼠IgG**组化试剂盒CY3和过氧化物酶 1ml|2ml|5ml
Phenelzine sulfate MAOI抑制剂(Phenelzine sulfate) 1mL(10mM)|100mg|500mg
Taltobulin Taltobulin 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
谷氨酸合成酶(GOGAT)生化试剂盒(微量法)大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 JEG-3(绒毛膜癌细胞)5×106cells/瓶×2
人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 JeKo-1(套细胞**瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Jurkat, Clone E6-1 (急性T**细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2
人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Jurkat/外周血白血病T细胞株国产
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Jurkat全细胞裂解液100μg国产
鸭白介素1(IL-1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K-562(慢性骨髓性白血病细胞)5×106cells/瓶×2
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K562/慢性髓性白血病细胞株国产
人抗斑疹伤寒抗体(anti-typhus-Ab)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K562全细胞裂解液100μg100μg
人未磷酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠维生素D(VD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 KATO III(胃癌细胞)5×106cells/瓶×2
豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 kasumi-1, 白血病细胞株
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