操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化试剂盒(微量法)
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微量法
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100管/48样
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BJ-01611114-100管/48样
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商品介绍:
测定意义:
脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯氨酸代谢因其初始底物不同,分为谷氨酸( Glu) 和鸟氨酸( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷氨酸为前体合成脯氨酸途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。
测定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸**P5C过程中分解ATP**ADP和无机磷,通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
BIBR 1532 telomerase抑制剂(BIBR 1532) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Betulin SREBP抑制剂(Betulin) 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
苏木素无水乙醇溶液(10%) 100ml
GSK-J4 H3K27me3demethylase抑制剂(GSK-J4) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Chlorambucil Chlorambucil 1mL(10mM)|100mg|500mg
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒(微量法) 100管/48样
Ultra sensitive Immunohistochemistry Kit (anti-rabbit&mouse IgG) 超灵敏抗小鼠/兔IgG**组化试剂盒 3ml|6ml|12ml|50ml
CX546 AMPAR受体激动剂(CX546) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Mazindol 食欲抑制剂(Mazindol) 1mL(10mM)|50mg|100mg
Astragalus polysaccharide PPAR-γ和PI3K/Akt激活剂 50mg
T0901317 LXR和FXR激动剂(T0901317) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
CCT129202 Aurora A/Aurora B和Aurora C抑制剂(CCT129202) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Chitinase-IN-1 壳聚糖酶和乙酰氨基己糖苷酶抑制剂(Chitinase-IN-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
幽门螺旋杆菌染色液(MGG法) 2×100ml
吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化试剂盒(微量法)��细胞角蛋白18(CK-18)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 U-2 OS, 骨肉瘤细胞
小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 U251(胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 U251胶质瘤细胞
大鼠端粒酶(TE)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 U266B1 [U266], 多发性骨髓瘤细胞
猴载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 U-87 MG(神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 U-937(组织细胞**瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人抗上腺皮质抗体(AAA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 U937/髓系白血病细胞株国产
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 UACC-812(导管瘤细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 UM-UC-3, 膀胱移行细胞癌
组装/原装 UM-UC-3(膀胱移行细胞癌)5×106cells/瓶×2
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