叶绿体分离和叶绿体酶提取生化试剂盒（差速离心法）

生化法检测试剂盒：分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法，自主**，技术**团队，操作简便快捷，规格合理、系列成套，价格合理，是广大科研工作者的好选择。

商品介绍：

测定意义

叶绿体是植物细胞内*重要、*普遍的质体，它是进行光合作用的细胞器。叶绿体利用其叶

绿素将光能转变为化学能，把 CO2 与水转变为糖。叶绿体是世界上成本*低、创造物质财

富*多的生物工厂，准确和**分离保持正常活性的叶绿体已经成为许多研究的前提。

测定原理

利用专门试剂温和匀浆组织或细胞���再采用差速离心法从匀浆中分离完整叶绿体，可以得到

保持活性的叶绿体酶。

需自备的仪器和用品

台式离心机、可调式移液器、匀浆器/研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

试剂一：液体 100mL×1 瓶，-20℃保存；

样本的前处理：

① 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一，用冰浴匀浆器或研钵匀浆，很

快研磨或捣碎，30 秒内完成，使之成为匀浆液。

② 将匀浆液于 200g（离心率），4℃离心 1min。

③ 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，1500g，4℃离心 5min。

④ 弃上清液，于沉淀中加入 0.5mL 试剂一混匀配成叶绿体悬浮液。混匀后测定叶绿体酶活

性。

仪器：

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

TAK-438 free base  H+/K+,ATPase抑制剂(TAK-438 free base)  1mL(10mM)|50mg|100mg

EAI045  突变体EGFR变构抑制剂  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg

N6-[2-(4-Aminophenyl)ethyl]adenosine  A3腺苷受体激动剂  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

EPZ005687  Epigenetic Reader Domain抑制剂  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

FITC Immunofluorescence Detection Kit (Rabbit)  FITC**荧光检测试剂盒(兔)  100次|300次

Copper Assay Kit  铜测定试剂盒(络合比色法)  R：10ml×5

E.coli TG1  TG1甘油菌  200μl

(+)-Cloprostenol  prostaglandin receptor激动剂  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

Atglistatin  ATGL抑制剂(Atglistatin)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

Diethylcarbamazine citrate  花生四烯酸代谢抑制剂（Diethylcarbamazine citrate）  1mL(10mM)|100mg|500mg

Bikinin  ATP抑制剂(Bikinin)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

SKF-82958 hydrobromide  多巴胺D1/D5受体激动剂  1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

SCIO-469  p38抑制剂(SCIO-469)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg

土壤硝态氮测试盒(微量法)  100管/96样

叶绿体分离和叶绿体酶提取生化试剂盒（差速离心法）人水蛭素(Hirudin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  神经元细胞完全培养基100mL

兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾癌细胞英文名称：Ketr-3

小鼠头瘤病毒16（HPV-16）ELISA试剂盒96T/48T试剂盒  肾癌细胞英文名称：OS-RC-2

大鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾成纤维细胞完全培养基100mL

大鼠乙酰胆碱(Ach)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾动脉内皮细胞完全培养基100mL

人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾动脉平滑肌细胞完全培养基100mL

人军团菌抗体IgM(LP Ab-IgM )ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾管状上皮细胞完全培养基100mL

人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾近曲小管上皮细胞英文名称：HK-2

兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾皮层上皮细胞完全培养基100mL

大鼠不对称甲基氨酸（ADMA）ELISA试剂盒96T/48T试剂盒  肾上腺神经母细胞瘤（脑转移）英文名称：KP-N-NS

小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  肾上皮细胞完全培养基100mL

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