操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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线粒体柠檬酸(MCA)含量生化试剂盒(微量法)
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微量法
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100管/96样
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BJ-01611147-100管/96样
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商品介绍:
测定意义:
CA是线粒体三羧酸循环的**个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。
配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。
测定原理:
CA在柠檬酸裂解酶的作用下,**α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,**相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
微波辐射抗原修复试剂盒 2×100ml
碱性磷酸酶测试盒(AKP) 48T
NFAT Inhibitor NFAT抑制剂(NFAT Inhibitor) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
中性甲醛钙固定液(10%) 500ml
GSK269962A ROCK抑制剂(GSK269962A) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
KIRA6 IRE1α RNase激酶抑制剂(KIRA6) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
PCI-34051 HDAC8抑制剂(PCI-34051) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
PCI-32765 Btk抑制剂(PCI-32765) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
Nifuroxazide STAT抑制剂(Nifuroxazide) 1mL(10mM)|200mg|500mg
标准革兰氏染色液 4×10ml|4×100ml|4×250ml|4×500ml
Cebranopadol ((1α,4α)stereoisomer) ORL-1激活剂 1mL(10mM)|2mg|5mg
western转移缓冲液(尼龙膜) 500ml
MHP SPHK1激活剂(MHP) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|20mg
1-Deoxynojirimycin α葡萄糖苷酶抑制剂(1-Deoxynojirimycin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
线粒体柠檬酸(MCA)含量生化试剂盒(微量法)小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病克隆细胞系英文名称:L6565
小鼠胰岛素(INS)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞英文名称:P388
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞英文名称:M1
鸡催素(PRL)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞英文名称:L1210
人不对称甲基氨酸(ADMA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞英文名称:M1
人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞英文名称:L1210
人血小板活化因子(PAF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞英文名称:P388
小鼠吡啶交联物(PY)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性英文名称:NFS-60
植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性英文名称:NFS-60
犬促卵泡素(FSH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠表皮角化细胞完全培养基100mL
大鼠可溶性瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 小鼠表皮黑色素细胞完全培养基100mL
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