线粒体苹果酸脱氢酶（MDHm）生化试剂盒（微量法）

生化法检测试剂盒：分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法，自主**，技术**团队，操作简便快捷，规格合理、系列成套，价格合理，是广大科研工作者的好选择。

商品介绍：

测定意义：

MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，**中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

测定原理：

MDHm催化NADH还原草酰乙酸**苹果酸，导致340nm处光吸收下降。

需自备的仪器��用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

仪器：

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

SK1-IN-1  鞘氨醇激酶1(SPHK1)抑制剂(SK1-IN-1)  1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

4-Demethylepipodophyllotoxin  微管组装抑制剂（4-Demethylepipodophyllotoxin）  1mL(10mM)|50mg|100mg

Afatinib  EGFR抑制剂/HER2抑制剂(Afatinib)  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

Verdinexor  SINE抑制剂(Verdinexor)  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

NMS-859  ATPase VCP/p97抑制剂（NMS-859）  1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

UNC 0631  G9a抑制剂(UNC 0631)  5mg|10mg|25mg|50mg

2-Methoxyestradiol  微管聚合和HIF-1抑制剂  1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

DAB chromogenic reagent kit For Western Blotting  Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(小鼠IgG)  1盒

Doxifluridine  胸苷磷酸化酶活化剂（Doxifluridine）  1mL(10mM)|1g|5g

Corynoxeine  ERK1/2抑制剂（Corynoxeine）  1mL(10mM)|5mg|10mg

PB磷酸盐缓冲液(0.01mol/L,pH7.2-7.4)  500ml

Verinurad  尿酸盐转运体抑制剂(Verinurad)  1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

Beta-Sitosterol  PPL抑制剂(Beta-Sitosterol)  1mL(10mM) in Ethanol|100mg|1g|5g

Sulfamethizole  PABA抑制剂(Sulfamethizole)  1mL(10mM)|500mg

线粒体苹果酸脱氢酶（MDHm）生化试剂盒（微量法）大鼠细胞色素P450(CYP450)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠成纤维细胞英文名称：3T3

人p物质(SP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠成纤维细胞英文名称：L929

人脂肪型脂肪酸结合蛋白（FABP4）ELISA试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠成纤维细胞英文名称：NIH 3T3

小鼠花生四烯酸(AA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠成纤维细胞（EGFP标记）

猪凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠垂体瘤细胞英文名称：MMQ

大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠垂体瘤细胞英文名称：MMQ

犬素(Renin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠垂体瘤细胞英文名称：AtT20

人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠垂体瘤细胞英文名称：AtT20

人前白蛋白(PA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠单核巨噬细胞白血病细胞英文名称：raw264.7

小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠肥大细胞癌细胞英文名称：P815

山羊白介素10(IL-10)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  小鼠单核巨噬细胞白血病细胞英文名称：raw264.7

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