操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)生化试剂盒50管/48样
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紫外分光光度法
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50管/48样
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BJ-01611162-50管/48样
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商品介绍:
测定意义PEPC(EC 4.1.1.31)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸与二氧化碳反应**草酰乙酸呈不可逆反应的酶,对三羧酸循环的运转起重要调节作用。测定原理PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2**草酰乙酸和HPO42-,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH**苹果酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算PEPC活性。需自备的仪器和用品紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
Aspartate aminotransferase Assay Kit 谷草转氨酶测试盒(微板法) 96T
Rhodamine (TRITC)-conjugated Streptavidin TRITC标记链霉亲和素 10μl
BCA蛋白浓度测定试剂盒 250次/500次/2500次
IRAK inhibitor 2 IRAK-4抑制剂(IRAK inhibitor 2) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Varespladib sPLA抑制剂(Varespladib) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
伊红染色液(醇溶,0.5%) 100ml|500ml
JK184 Hedgehog(Hh)抑制剂(JK184) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
AV-412 free base EGFR抑制剂(AV-412 free base) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
Fasudil Hydrochloride ROCK-II/PKA/PKG/PKC/MLCK抑制剂 1mL(10mM)|100mg|200mg|500mg
PIK-75 p110α抑制剂(PIK-75) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
总脂酶测试盒(脂蛋白脂酶LPL和肝脂酶HL测试盒) 48T
醇脱氢酶(ADH)测试盒(紫外分光光度法) 50管/48样
SMER28 SMER28 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
PBS-T(含有0.05%Tween-20)缓冲系统封闭液 500ml
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)生化试剂盒50管/48样人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 CRFK(猫肾细胞) 5×106cells/瓶×2
兔钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 CT26.WT(小鼠结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Daudi(**瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
鹅促黄体**(LH)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 DH82(犬巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 DLD-1(结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人β2糖蛋白1抗体IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 DU 145(前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 EAC(小鼠艾氏腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2
人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 Eca-109(食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 EL4(小鼠**瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
大鼠**细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 WB-F344(大鼠肝上皮样干细胞) 5×106cells/瓶×2
植物钙调素(CAM)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒 ES-2(卵巢透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2
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