操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主**,技术**团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,是广大科研工作者的好选择。
产品名称
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测定方法
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规格
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货号
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糖原磷酸化酶b(GPb)生化试剂盒50管/24样
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紫外分光光度法
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50管/24样
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BJ-01611379-50管/24样
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商品介绍:
测定意义:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
测定原理:
GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基**糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原**NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
纤维化蛋白(FBS)ELISA试剂盒 Fibrosin(FBS)ELISA Kit
纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)ELISA试剂盒 Fibrinogen Like Protein 1(FGL1)ELISA Kit
纤维蛋白原γ(FGγ)ELISA试剂盒 Fibrinogen Gamma(FGg)ELISA Kit
纤维蛋白原β(FGβ)ELISA试剂盒 Fibrinogen Beta(FGb)ELISA Kit
纤维蛋白原α(FGα)ELISA试剂盒 Fibrinogen Alpha(FGa)ELISA Kit
纤维蛋白原(FG)ELISA试剂盒 Fibrinogen(FG)ELISA Kit
纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒 Fibrinopeptide B(FPB)ELISA Kit
纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒 Fibrinopeptide A(FPA)ELISA Kit
纤维蛋白(FBL)ELISA试剂盒 Fibrillarin(FBL)ELISA Kit
纤溶抑制因子(TAFI)ELISA试剂盒 Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor(TAFI)ELISA Kit
糖原磷酸化酶b(GPb)生化试剂盒50管/24样PDK1抑制剂(GSK2334470)GSK23344701mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
DUBs抑制剂(VLX1570)VLX15701mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
NADPH氧化酶抑制剂(Apocynin)Apocynin1mL(10mM)|1g|5g
泛PIM抑制剂PIM-447 dihydrochloride1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
泛WNK-kinase抑制剂(WNK463)WNK4631mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
LDHA抑制剂(GNE-140 racemate)GNE-140 racemate1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
VCP/p97抑制剂(NMS-873)NMS-8731mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
HDAC6抑制剂(ACY-1215)ACY-12151mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
PI3K抑制剂(GSK2126458)GSK21264581mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Met-related抑制剂(BMS 777607)BMS 7776071mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
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