原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
组织来源
肺组织
货号
P-X1524
产品规格
5×105
生长特性
贴壁
产品类别
大鼠原代细胞
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
大鼠肺成纤维细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺器官的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠肺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的大鼠肺成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
小鼠主动脉内皮细胞 Mouse aortic endothelial cells；MAEC
草地夜蛾卵巢细胞；Sf9
人瘢痕疙瘩成纤维细胞 Human primary scar fibroblasts
人二倍体细胞；HEL
6T-CEM (人T细胞白血病细胞) (STR鉴定正确)
转化人肝上皮细胞
大鼠肺微血管内皮细胞
人胎盘绒膜癌细胞
猪胰腺腺泡上皮细胞
肿瘤细胞
小鼠杂交瘤细胞；HB JDSHCC39
TATA盒结合蛋白相关因子TAF1A抗体 TAF1A
狗微管相关蛋白tau(MAPT)elisa分析检测试剂盒
AF750标记的CD163抗体 CD163, Alexa Fluor 750 conjugated
A2BP1
T细胞分化蛋白MAL2抗体 MAL2
共济失调蛋白2结合蛋白1抗体
纺锤体和着丝粒相关蛋白3抗体 SKA3
Histone H2B (di methyl K5)
细胞角蛋白19单克隆抗体 Cytokeratin 19
二甲基组蛋白H2B K5抗体
硒磷酸化物合成酶1抗体 SEPHS1
200微升1厘米光径塑料比色皿
富含精氨酸/丝氨酸剪切因子17A抗体 SFRS17A
APC-Cy5.5标记小鼠CD4单克隆抗体 Mouse CD4/APC-Cy5.5
HER2受体单克隆抗体 HER2 receptor
细胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
载脂蛋白H抗体 APOH
赖脯胰岛素抗体 Insulin Lispro
有丝分裂细胞周期蛋白MPP9抗体 MPHOSPH9
精子顶体膜相关蛋白4抗体 SPACA4
驱动蛋白家族成员24抗体 KIF24
组织氯乙酰基转移酶（CAT）报告基因活性位素定量检测试剂盒
葡萄糖转运蛋白4增强因子抗体 SLC2A4RG
大鼠抗凝血酶受体(ATR)elisa检测试剂盒
人anti-Survivinelisa检测试剂盒
G蛋白偶联受体65抗体 GPR65
小鼠丙糖磷酸异构酶1(TPI1)elisa检测试剂盒
大鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa分析检测试剂盒
植物聚甲基半乳糖醛酸酶（Polymethylgalacturonase；PMG）活性比色法定量检测试剂盒
大鼠8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)elisa检测试剂盒
大鼠肺成纤维细胞α1微球蛋白α1- MG试剂盒 R1：40ml×1 R2：10ml×1 胶乳增强
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。