原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X1696 产品规格 5×105 组织来源 脊髓 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 产品类别 大鼠原代细胞 传代特性 可传2-3代 用途 仅供科研
产品货号
P-X1696
产品规格
5×105
组织来源
脊髓
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
产品类别
大鼠原代细胞
传代特性
可传2-3代
用途
仅供科研
大鼠脊髓微血管内皮细胞分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的神经系统延伸部分。神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由神经细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成;脊髓是许多简单反射的。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。微血管又称。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7~9微米,数量极多,成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成,厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织,其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的由一个内皮细胞围成管腔,较粗的由2~3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的,内皮细胞间为缝隙连接(缝隙宽150埃),称连续;分布于腺、肾脏等处的,除有缝隙连接外,细胞本身有许多小孔,(孔径800~1000埃),称有孔;分布于肝、脾、骨髓及某些腺的,管腔扩大,称血窦。的管壁薄、通透性大、管径细(8~10微米)、数量多、血流速度慢,这些特点使其成为血液与组织液进行物质交换的场所,又称交换血管。血窦(sinusoid)由管腔扩大而成,窦壁的一般结构与壁相同,由单层内皮细胞构成,内皮细胞膜上有窗孔。不同器官的窦壁结构各有差别。脾血窦的内皮细胞间有较宽裂隙;肝血窦内皮细胞是不连续的,有较宽的细胞隙(0.1~0.5微米);肝、脾血窦的基膜不完整或无基膜,通透性比大,较大的蛋白质和血细胞可以通过。肝血窦壁内有枯否细胞,脾血窦内外有巨噬细胞,这两种细胞都有吞噬能力,可吞噬血液中的异物、等有害物质,是机体单核巨噬细胞系统的重要组成分。某些腺的血窦有连续的基膜。
方法简介:
实验室分离的大鼠脊髓微血管内皮细胞采用中性蛋白酶 - 胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的大鼠脊髓微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。