原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X1566 产品规格 5×105 组织来源 结肠 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 产品类别 大鼠原代细胞 传代特性 可传3代左右 用途 仅供科研
产品货号
P-X1566
产品规格
5×105
组织来源
结肠
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
大鼠原代细胞
传代特性
可传3代左右
用途
仅供科研
大鼠结肠成纤维细胞分离自结肠组织;结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠成纤维细胞主要分布于外膜(纤维膜或浆膜)结缔组织内。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的结肠成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介:
实验室分离的大鼠结肠成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的大鼠结肠成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件:
培养基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。