原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
产品货号
P-X1589
产品规格
5×105
组织来源
肾组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
产品类别
大鼠原代细胞
传代特性
可传2-3代
用途
仅供科研
细胞简介：
大鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是**尿液，借以体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有功能，**肾素、促红细胞**素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分的降解场所和肾外的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤**原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的道屏障，可粘附和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
小鼠肾周细胞 Primary mouse perirenal cells
抗SARS病毒N蛋白小鼠杂交瘤细胞；S03
人脊柱炎髋关节滑膜成纤维细胞 Fibroblasts of the synovial membrane of the hip joint in primary human spondylitis
小鼠杂交瘤细胞(抗SAP)；CY12.14
HK-2 (人肾皮质近曲小管上皮细胞) (STR鉴定正确)
小鼠食管癌细胞
兔骨髓单核细胞
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞（B类）
大鼠中耳上皮细胞 Primary middle ear epithelial cells in rats
杂交瘤细胞；C9D11
小鼠杂交瘤细胞株；CTNI-C4
GPRIN2
肌动蛋白结合蛋白1抗体
FGF4 ELISA Kit
Bile salt-activated lipase
大鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)elisa分析检测试剂盒
胆盐激活脂肪酶抗体
四分子交联体14抗体（四旋蛋白） Anti-TSPAN14
LIMKAIN B1
G蛋白调节诱导神经突蛋白2抗体
减数分裂阻滞蛋白1抗体
Rat IgG / AF647
ABLIM1
Alexa Fluor 647标记大鼠IgG（型对照)
小鼠B细胞活化因子(BAFF)elisa分析检测试剂盒
突触结合蛋白12抗体 Anti-Synaptotagmin XII
HMGB2
磷酸化血小板源性生长因子受体-B抗体 Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)
高迁移率族蛋白2重组兔单克隆抗体
磷酸化泌乳素抗体 Anti-phospho-PRL (Ser163)
BAFFELISAKit
7号染色体开放阅读框68抗体
原癌基因WIP1抗体 Anti-WIP1/PPM1D
TBL1Y
胚胎生长相关蛋白MAK10抗体
转导β样蛋白1抗体
CTC1
环指蛋白123抗体 Anti-RNF123
MAK10
睾丸凋亡基因抗体 Anti-SRG11/Spata17
磷酸化细胞核分离基因C蛋白抗体 Anti-phospho-NUDC(Ser326)
16号染色体开放阅读框72抗体
大鼠肾小球内皮细胞C16orf72
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。