产品货号
P-X1626
产品规格
5×105
组织来源
输卵管
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
产品类别
大鼠原代细胞
传代特性
可传1-2代
用途
仅供科研
细胞简介：
大鼠输卵管上皮细胞分离自输卵管组织；输卵管位于底两侧，包裹在阔韧带上缘内。自两角分别伸展至左、右卵巢，是输送卵细胞进入的管道，也是卵受精的场所。输卵管主要分漏斗部、壶腹部、峡部和部，管壁均由粘膜、肌层和浆膜三层组成。粘膜形成许多纵行而分支的皱襞，壶腹部的皱襞发达，高而多分支，故管腔不规则；至部的皱襞渐减少。粘膜上皮为单层柱状。由纤毛细胞和分泌细胞���成。纤毛细胞以漏斗部和壶腹部多，至峡部和部逐渐减少，纤毛向方向摆动，使卵移向并阻止病菌进入腹膜腔.分泌细胞表面有微绒毛，顶部胞质内有分泌颗粒，其分泌物构成输卵管液。输卵管上皮细胞在卵巢雌和孕的作用下，随月经周期而有变化。雌促进输卵管上皮细胞的生长的功能活动，在内膜晚期（排卵前）。纤毛细胞变成高柱状，纤毛增多，分泌细胞顶部充满分泌颗粒，功能旺盛。至分泌晚期，两种细胞均变矮，分泌细胞的分泌颗粒排空，纤毛细胞的纤毛也减少。
实验室分离的大鼠输卵管上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的大鼠输卵管上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
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原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
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