原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
产品货号
P-X1390
产品规格
5×105
组织来源
卵巢组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
产品类别
人原代细胞
传代特性
可传3代左右
用途
仅供科研
细胞简介：
人卵巢微血管内皮细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、管和神经。微血管又称。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7～9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的微血管由2～3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现，不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。
方法简介：
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
小鼠结膜上皮细胞 Mouse primary conjunctival epithelial cells
小鼠肺成纤维样细胞；C57/B6-L
人乳腺成纤维细胞 Primary human breast fibroblasts cells
小鼠杂交瘤细胞；IF4B7
SMMC-7721 (人肝癌细胞)
小鼠肥大细胞
人肠微血管内皮细胞
人恶性多发性畸胎瘤细胞
大鼠肾小球内皮细胞 Rat glomerular endothelial cells
小鼠杂交瘤细胞株；5D2F2
小鼠杂交瘤细胞株；SZCIQASFV2
FRZB/FRP-3
人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)elisa分析检测试剂盒
3-DPG ELISA Kit
肌间蛋白1抗体 MYOM1
犬2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析检测试剂盒
环指蛋白25抗体 RNF25
类固醇硫酸酯酶抗体 Anti-SSDD/Steroid sulfatase
1号染色体开放阅读框63抗体 NPD014
FRZB蛋白抗体
14号染色体开放阅读框130抗体 C14orf130
Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE
PARPELISAKit
PE标记的驴抗羊IgG H&L
小鼠胱天蛋白酶5(CASP-5)elisa分析检测试剂盒
纺锤体和着丝粒相关蛋白1抗体 Anti-SKA1
Monkey slit homolog 2(Drosophila)(SLIT2)ELISA kit
6磷酸果糖激酶1抗体 Anti-PFK1
猴slit源物2(果蝇)(SLIT2)elisa分析检测试剂盒
PDZ结构域蛋白GOPC抗体 Anti-PIST/GOPC
CASP5ELISAkit
球蛋白A诱导源蛋白抗体
小鼠中性粒细胞趋化因子-1（CINC-1）elisa检测试剂盒
PRRG4
INO80D蛋白抗体
跨膜γ羧基酸蛋白4抗体
IGIP
人补体蛋白3(C3)elisa检测试剂盒免费代测
INO80D
细胞诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶（iNOS /NOS2/mNOS）活性荧光定量检测试剂盒
大鼠催产素(OT)elisa检测试剂盒
3号染色体开放阅读框67抗体
人卵巢微血管内皮细胞C3orf67
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。