原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
产品货号
P-X1369
产品规格
5×105
组织来源
乳腺组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
人原代细胞
传代特性
可传5代左右；3代以内状态佳
用途
仅供科研
细胞简介：
人乳腺成纤维细胞分离自乳腺组织；乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间，浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间，形成许多间隔，这些纤维结缔组织对起固定作用，而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的乳腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
公司实验室分离的人乳腺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的人乳腺成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
小鼠脊髓成纤维细胞 Primary mouse spinal cord fibroblasts
家猫肾细胞；CATK1
人肾足细胞 Primary human renal podocytes
猪肾细胞；PK（15）
U-87 MG (人脑星形胶质母细胞瘤细胞) (STR鉴定正确)
腺病毒转化的人胚肾细胞
小鼠小肠隐窝上皮细胞
人脑星形胶质母细胞瘤
Y1 [Y-1] (小鼠肾上腺皮质瘤细胞) (种属鉴定正确)
小鼠杂交瘤细胞；ZUC3
小鼠杂交瘤细胞；SCGN-F9
半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗体 Caspase-7 p11
人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)elisa分析检测试剂盒
CSRNP3蛋白抗体 CSRNP3
HumanIL-7ELISAkit
丙酮酸脱氢酶激酶亚型2单克隆抗体 PDK2
人白介素7(IL-7)elisa生化检测试剂盒
关节炎相关基因抗体 PADI4
T3 ELISA kit
锌指蛋白274抗体 ZNF274
三碘甲状腺原氨酸(T3)elisa生化检测试剂盒
小鼠抗人HLA-DR单克隆抗体 human HLA-DR
大鼠B细胞κ轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa检测试剂盒
核苷酸内焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗体 ENPP1
DNAJC5B蛋白抗体 DNAJC5B
NLRP13蛋白抗体 NLRP13
植物氧化型甘肽（GSSG）浓度比色法定量检测试剂盒
转录因子HRT3抗体 Hey L
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗体 Phospho-MKK3(Ser218) + MKK6(Ser207)
猪蓝耳病病毒M蛋白抗体 PRRSV M protein
磷酸化γ氨基丁酸γ2受体抗体 phospho-GABRG2 (Ser366)
神经细胞囊泡循环蛋白4抗体 Synaptogyrin 4
小鼠纤维介素蛋白(FGL2)elisa检测试剂盒
身材矮小源盒基因SHOX2抗体 SHOX2
大鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)elisa检测试剂盒
大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)elisa检测试剂盒
MXI1蛋白抗体 MXI1
人白介素10(IL-10)elisa分析检测试剂盒
大鼠泛素连接酶(E3/UBPL)elisa检测试剂盒免费代测
植物葡萄糖磷酸变位酶（phosphoglucomutase；PGM）
细胞含量比色法定量检测试剂盒
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)elisa检测试剂盒
人乳腺成纤维细胞人布卢姆综合征蛋白(BLM)elisa分析检测试剂盒
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。