原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X2114 产品规格 5×105 组织来源 睾丸 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 产品类别 兔原代细胞 传代特性 可传2-3代 用途 仅供科研
产品货号
P-X2114
产品规格
5×105
组织来源
睾丸
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传2-3代
用途
仅供科研
兔睾丸支持细胞分离自睾丸;睾丸支��细胞又称Sertoli细胞,在体内呈不规则的高锥体形,细胞基部附着在基膜上,顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架,为其提供必需的营养物质,能合成与分泌雄结合蛋白,为其提供高浓度的雄环境等,还具有构成血-睾屏障,形成睾丸内微环境,调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞,能分泌多种生长因子和抑制因子,不仅可为精子提供营养支持和保护,也能对其他细胞,如胰岛和神经细胞提供营养支持,而且当其与胰岛或神经细胞共移植时,也能够为这些细胞提供保护,提高植活率。因此,睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值,而且在精子发生等领域有重要意义。
方法简介:
实验室分离的兔睾丸支持细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔睾丸支持细胞经Fas-L荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。