原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X2219 产品规格 5×105 组织来源 晶状体组织 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 产品类别 兔原代细胞 传代特性 可传2-3代 用途 仅供科研
产品货号
P-X2219
产品规格
5×105
组织来源
晶状体组织
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传2-3代
用途
仅供科研
兔晶状体上皮细胞分离自晶状体组织;晶状体源自胚胎发育外胚层,仅含有上皮细胞及其产物,晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开;因而,晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰,又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染,保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。
方法简介:
公司实验室分离的兔晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的兔晶状体上皮细胞经BFSP2(晶状体蛋白)荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。