原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X2140 产品规格 5×105 组织来源 软骨组织 生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形 产品类别 兔原代细胞 传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳 用途 仅供科研
产品货号
P-X2140
产品规格
5×105
组织来源
软骨组织
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传5代左右;3代以内状态佳
用途
仅供科研
兔软骨细胞分离自关节软骨组织;关节软骨属于透明软骨,表面光滑、呈淡蓝色、有光泽,它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架,这种框架呈半环形,类似拱形球门,其底端紧紧附着在下面的骨质上,上端朝向关节面,这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来,同时当受到压力时候,还可以有少许的变形,起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间,散在分布着软骨细胞,软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成,这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有神经支配,也没有血管,其营养成分必须从关节液中取得,而其代谢废物也必须排至关节液中,关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动,使关节软骨不断的受到压力刺激才行,所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层,单个分布、体积较小、呈椭圆形,长轴与关节软骨表面平行,越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形、染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内,这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,关节软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,关节软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的兔关节软骨细胞采用胶原酶联合中性蛋白酶消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的兔关节软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。