产品货号
P-X2107
产品规格
5×105
组织来源
肾上腺
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传1-3代左右;2代以内状态佳
用途
仅供科研
细胞简介:
兔肾上腺皮质细胞分离自肾上腺组织;肾��腺是机体相当重要的器官,由于位于两侧肾脏的上方,故名肾上腺。肾上腺左右各一,位于肾的上方,共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形,右肾上腺为三角形。从侧面观察,腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分,周围部分是皮质,内部是髓质。肾上腺内部是髓质部分,分泌肾上腺素和去甲肾上腺素。这些在应激状态释放增多,能够帮助升高血压,加快心率,升高血糖,动员全身的储备物质,为机体与外界环境的抗争作好充分准备。肾上腺外部是皮质部分,分泌醛固酮、皮质醇和少量的雌雄。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收,正常数量的醛固酮,对维持机体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌,会导致高血压和低血钾。皮质醇是机体必需的之一。当机体处于应激状态时,比如感冒,发烧,遇到突发事件的时候,肾上腺皮质分泌大量的皮质醇,这些皮质醇能够动员机体的存储能源,为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当皮质醇缺乏时,机体在遇到重大事件的时候,往往缺乏足够应对能力,容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄,对雄性来讲,并非必不可少,但是对雌性而言,是雄的一个重要来源。
实验室分离的兔肾上腺皮质细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔肾上腺皮质细胞经3β-HSD荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传1-3代左右;2代以内状态佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代细胞实验步骤:
以胚胎小鼠为例 1.取材:将孕鼠拉颈椎处死,投入75%酒精浸泡数秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织,打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2.用Hanks液洗涤3次,剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3.用弯头剪把胚胎尽量剪碎,每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行,即消化法和组织块培养法。 4.若使用消化法,则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液,800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清,加入带有双抗的培养基,放入培养瓶中培养。 注:细胞分离的方法各实验室不同,所采用的消化酶也不相同(如胶原酶,透明质酶等)。 5.若进行组织块培养,则不做步骤4,加入几滴血清于组织块中,再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开,注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2-3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来,从边角加入4~5mL培养基,使细胞接触到培养基,放培养箱内继续进行培养。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
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