原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
兔肾小球系膜细胞
产品货号 P-X2080 产品规格 5×105 组织来源 肾 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 产品类别 兔原代细胞 传代特性 可传1-2代 用途 仅供科研
产品货号
P-X2080
产品规格
5×105
组织来源
肾
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传1-2代
用途
仅供科研
兔肾小球系膜细胞分离自肾小球组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤**原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球系膜是位于肾小球袢之间的一种特殊间充质,由系膜细胞和系膜基质组成。肾小球系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞,具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。肾小球系膜细胞和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现。肾小球系膜细胞的培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。系膜细胞的主要作用可能有:①收缩作用,入球小动脉和出球动脉的收缩作用受系膜细胞的调节,以影响袢的内压和滤过率;②支持作用,它填充于袢之间,支持的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜内的大分子物质和蛋白质;④分泌肾素,在肾缺血或复合物沉积时,系膜细胞且分泌肾素。
方法简介:
实验室分离的兔肾小球系膜细胞采用机械研磨法结合不同孔径不锈钢网筛过滤后使用胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔肾小球系膜细胞经α-SMA荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。