原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
组织来源
食管
货号
P-X2046
产品规格
5×105
生长特性
贴壁
产品类别
兔原代细胞
细胞形态
成纤维细胞样
细胞简介：
兔食管平滑肌细胞分离自食管组织；食管可分为颈段、胸段和腹段，脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，肌层上1/3段为骨骼肌，下1/3为平滑肌，中段为骨骼肌和平滑肌混合组成。其中，肌纤维的排列方式分为内环形和外纵形两层。食管的蠕动是由食管平滑肌收缩严格控制，食管还有括约肌，位于环状软骨水平的，称为食管上括约肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿过膈孔，另一部分在膈下的高压带，称为食管下括约肌。食管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介：
实验室分离的兔食管平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔食管平滑肌细胞经α-SMA荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
兔小肠隐窝上皮细胞 Rabbit intestinal crypt epithelial cells
小鼠杂交瘤细胞；CHGF-002
小鼠肝外胆管上皮细胞 Primary mouse extrahepatic bile duct epithelial cells
杂交瘤细胞；H1H8
NCI-H23 (人非小细胞肺癌细胞) (STR鉴定正确)
人套细胞瘤细胞
小鼠输尿管上皮细胞
人耐VP16绒癌细胞株
Sf21 (昆虫卵巢细胞)
小鼠源细胞
小鼠杂交瘤细胞；2G9B9H6A2
α横纹肌辅肌动蛋白/α-SCA抗体 Sarcomeric Alpha Actinin
大鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)elisa检测试剂盒
ATP依赖解旋酶DDX18抗体 DDX18
ANKRD6
γ-原肌球蛋白/原肌球蛋白3抗体 Tropomyosin 3
锚蛋白重复域6抗体
甘氨酸裂解系统H蛋白抗体 GCSH
INO80E
衔接蛋白β抗体 AP2 beta
INO80E蛋白抗体
细胞纤毛内转运源蛋白46抗体 IFT46
显微镜检测试剂盒
干扰素调节因子9抗体 IRF9/ISGF3
B细胞成熟因子（CD269）抗体 BCMA
LARP6蛋白抗体 LARP6
小鼠金属硫蛋白1(MT-1)elisa检测试剂盒
中心体蛋白CEP170抗体 CEP170
磷酸化cGMP依赖性蛋白激酶1抗体 phospho-cGKI (Thr515)
整合素样金属蛋白酶与凝血酶10型抗体 ADAMTS10
辣根酶标记β2-微球蛋白单克隆抗体 beta 2 Microglobulin (7B5)/HRP
溶质载体家族25成员41抗体 SLC25A41
小鼠17-α甲睾酮(17-αMT)elisa检测试剂盒
人类白细胞抗原A抗体 HLA Class 1 ABC /HLA ABC
食物D-葡萄糖酸盐比色法定量检测试剂盒
通用型蛋白共沉淀（蛋白G树脂）试剂盒
KCTD9蛋白抗体 KCTD9
大鼠晚期糖基化终末产物（AGE）elisa检测试剂盒
组织血管紧张素Ⅰ转化酶1（ACE1）活性荧光共振能量转移法（FRET）定量检测试剂盒
小鼠胰蛋白酶1(trypsin-1)elisa检测试剂盒
高尔基体铜离子荧光（CTAP-1）染色试剂盒
人白血病抑制因子受体(LIFR)elisa检测试剂盒
兔食管平滑肌细胞大鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)elisa检测试剂盒免费代测
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。