原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X2242 产品规格 5×105 组织来源 视网膜 生长特性 贴壁 细胞形态 神经元细胞样 产品类别 兔原代细胞 传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 用途 仅供科研
产品货号
P-X2242
产品规格
5×105
组织来源
视网膜
生长特性
贴壁
细胞形态
神经元细胞样
产品类别
兔原代细胞
传代特性
属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
用途
仅供科研
兔视网膜神经节细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力强。视网膜神经节细胞贴壁后呈单层排列,部分细胞聚集成团,细胞呈圆形或椭圆形,核圆且相对透明,有些细胞膜上伸出短而小的突起;该细胞为高度分化细胞,在体外属于不增殖群。视网膜神经节细胞是青光眼病理性损害的主要细胞,视网膜神经节细胞的死亡可导致视功能不可逆损伤,研究视网膜神经节细胞损害的细胞学和分子生物学机制有利于青光眼发病机制的研究。
方法简介:
实验室分离的兔视网膜神经节细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法,结合视网膜神经节细胞培养基培养和化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔视网膜神经节细胞经CD90荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:基础培养基,含FBS、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:神经元细胞样
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。