原代细胞培养的具体操作步骤： 1.组织处理：将动物组织从机体中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理，使其分散成单个细胞。 2.细胞计数：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。 3.接种培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X2051 产品规格 5×105 组织来源 小肠 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 产品类别 兔原代细胞 传代特性 可传1-2代 用途 仅供科研
产品货号
P-X2051
产品规格
5×105
组织来源
小肠
生长特性
贴壁
细胞形态
上皮细胞样
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传1-2代
用途
仅供科研
兔小肠黏膜上皮细胞分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠黏膜吸收了。小肠管壁由黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，黏膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜反应的发生、性质和强度。
方法简介：
实验室分离的兔小肠黏膜上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔小肠黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
传代特性：可传1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
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原代培养与传代培养的区别：
1. 细胞来源
原代培养：所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大，更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项： 一、在进行原代细胞培养时，需要注意以下几点： 二、无菌操作：整个过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。 三、细胞融合和传代：跟踪细胞的融合状态，适时进行传代，避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏：对于需要长期保存的细胞，可以进行冷冻保存，并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换：根据细胞类型选择合适的培养基，并定期更换以保证营养充足。