原代细胞培养的具体操作步骤: 1.组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理,使其分散成单个细胞。 2.细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。 3.接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X2162 产品规格 5×105 组织来源 脂肪 生长特性 贴壁 细胞形态 梭形、多角形、圆形 产品类别 兔原代细胞 传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 用途 仅���科研
产品货号
P-X2162
产品规格
5×105
组织来源
脂肪
生长特性
贴壁
细胞形态
梭形、多角形、圆形
产品类别
兔原代细胞
传代特性
属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
用途
仅���科研
兔脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的系统。脂肪细胞分为白色脂肪细胞和褐色(棕色)脂肪细胞,常呈白色,在婴幼儿期大量增殖,到青春期数量达到,此后数量一般不再增加。细胞内含有大量富含脂肪的小泡,称为脂质泡,富含光面内质网。此外,还有一种褐色脂肪细胞,在动物体内主要存在于肩胛骨间、颈背部、腋窝、纵隔及肾脏周围,含有高度团缩的褐色脂肪,作用是将脂质分解产热,调节体内脂质比例。
方法简介:
实验室分离的兔脂肪细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法获得前脂肪细胞,经成脂诱导培养基诱导培养制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
实验室分离的兔脂肪细胞经油红O染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形、圆形
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
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原代培养与传代培养的区别:
1. 细胞来源
原代培养:所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大,更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项: 一、在进行原代细胞培养时,需要注意以下几点: 二、无菌操作:整个过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。 三、细胞融合和传代:跟踪细胞的融合状态,适时进行传代,避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏:对于需要长期保存的细胞,可以进行冷冻保存,并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换:根据细胞类型选择合适的培养基,并定期更换以保证营养充足。