产品货号
P-X1868
产品规格
5×105
组织来源
睾丸组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
小鼠原代细胞
传代特性
可传3代左右
用途
仅供科研
细胞简介:
小鼠睾丸支持细胞分离自睾丸;睾丸支持细胞又称Sertoli细胞,在体内呈不规则的高锥体形,细胞基部附着在基膜上,顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架,为其提供必需的营养物质,能合成与分泌雄结合蛋白,为其提供高浓度的雄环境等,还具有构成血-睾屏障,形成睾丸内微环境,调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞,能分泌多种生长因子和抑制因子,不仅可为精子提供营养支持和保护,也能对其他细胞,如胰岛和神经细胞提供营养支持,而且当其与胰岛或神经细胞共移植时,也能够为这些细胞提供保护,提高植活率。因此,睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值,而且在精子发生等领域有重要意义。
公司实验室分离的小鼠睾丸支持细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的小鼠睾丸支持细胞经Fas-L荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
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原代细胞实验步骤:
以胚胎小鼠为例 1.取材:将孕鼠拉颈椎处死,投入75%酒精浸泡数秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织,打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2.用Hanks液洗涤3次,剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3.用弯头剪把胚胎尽量剪碎,每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行,即消化法和组织块培养法。 4.若使用消化法,则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液,800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清,加入带有双抗的培养基,放入培养瓶中培养。 注:细胞分离的方法各实验室不同,所采用的消化酶也不相同(如胶原酶,透明质酶等)。 5.若进行组织块培养,则不做步骤4,加入几滴血清于组织块中,再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开,注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2-3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来,从边角加入4~5mL培养基,使细胞接触到培养基,放培养箱内继续进行培养。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
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