原代细胞培养的具体操作步骤： 1.组织处理：将动物组织从机体中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理，使其分散成单个细胞。 2.细胞计数：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。 3.接种培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。
产品货号 P-X1991 产品规格 5×105 组织来源 巩膜组织 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 产品类别 小鼠原代细胞 传代特性 可传1-3代左右 用途 仅��科研
产品货号
P-X1991
产品规格
5×105
组织来源
巩膜组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
小鼠原代细胞
传代特性
可传1-3代左右
用途
仅��科研
小鼠巩膜成纤维细胞分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠巩膜成纤维细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的小鼠巩膜成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
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原代培养与传代培养的区别：
1. 细胞来源
原代培养：所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大，更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项： 一、在进行原代细胞培养时，需要注意以下几点： 二、无菌操作：整个过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。 三、细胞融合和传代：跟踪细胞的融合状态，适时进行传代，避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏：对于需要长期保存的细胞，可以进行冷冻保存，并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换：根据细胞类型选择合适的培养基，并定期更换以保证营养充足。