原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
产品货号
P-X1978
产品规格
5×105
组织来源
视网膜组织
生长特性
贴壁
细胞形态
内皮细胞样
产品类别
小鼠原代细胞
传代特性
可传2-3代
用途
仅供科研
细胞简介：
小鼠视网膜微血管内皮细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞，它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用，在视网膜血管的发病机制中有重要病理生理学意义。由于从不同的组织和器官获得的内皮细胞具有不同的特性，在脑和视网膜中，这些内皮细胞具有内屏障的功能，在调节血管生理状态，释放血管活性物质以及新生血管的形成中发挥着重要作用，体外分离培养RCEC对研究视网膜血管性发展的病理生理机制以及的早期防治具有重要临床意义。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠视网膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的小鼠视网膜微血管内皮细胞经CD31荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
兔滑膜间充质干细胞 Rabbit synovial mesenchymal stem cells
人卵巢癌细胞；OV3R-PTX
小鼠食管上皮细胞 Mouse primary esophageal epithelial cells
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞；MC3T3-E1
FHs 74 Int (人小肠上皮细胞)
人类风湿性关节炎成纤维细胞
人脑膜细胞
KPL-4 人乳腺癌细胞
NCI-H226 [H226] (人肺鳞癌细胞) (STR鉴定正确)
人咽鳞癌细胞；FaDu
人急性细胞白血病细胞；CEM/C1
HumanTuberculinELISAKit
尾侧型源转录因子1抗体
小鼠17-酮类固醇(17-KS)elisa检测试剂盒
C11orf74
活体内蛋白质交联共沉淀检测试剂盒
11号染色体开放阅读框74抗体
转导素β1X连锁蛋白抗体 Anti-TBL1X
LYSMD3
人结核菌素(Tuberculin)elisa分析检测试剂盒
LYSMD3蛋白抗体
MCP-3 ELISA kit
CDX1
大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa分析检测试剂盒
大鼠脱氧胶原吡啶交联(DPD)elisa检测试剂盒
滑膜肉瘤X断点蛋白5抗体 Anti-SSX5
KCNQ5
视黄醇结合蛋白4抗体 Anti-RBP4
电压门控钾通道亚基Kv7.5抗体
核孔蛋白50抗体 Anti-NUP50
石蜡切片铜荧光（CSI）染色试剂盒
肾病样蛋白3抗体
丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体 Anti-SEK1/MKK4/MAP2K4
Ractopamine
E3泛素连接酶NEDD4结合蛋白1抗体
莱克多巴胺单克隆抗体
NLG1
磷酸化蛋白激酶C mu型抗体 Anti-phospho-PRKD1(Tyr463)
N4BP1
味觉受体蛋白家族2亚基60抗体 Anti-T2R60
磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体 Anti-Phospho-eNOS (Thr495)
纤连蛋白2抗体
小鼠视网膜微血管内皮细胞Fibulin 2
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。