原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
产品货号
P-X1855
产品规格
5×105
组织来源
胰腺组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
小鼠原代细胞
传代特性
可传3-5代左右
用途
仅供科研
细胞简介：
小鼠胰腺星状细胞分离自胰腺组织；胰腺分为外分泌腺和腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠，有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成，胰岛主要由4种细胞组成：α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β细胞分泌胰岛素，降低血糖；γ细胞分泌生长抑素，以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌；PP细胞分泌胰多肽，抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星状细胞（PSC）是胰腺纤维化的主要效应细胞，PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴，并表达Desmin蛋白，活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白（alpha-SMA）。PSC具有静息态与激活态两种，并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色，阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现，原代分离的细胞培养6d，胞浆中仍可见明显的脂滴，传代后，橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。细胞化学染色显示，细胞接种24h仍然表达Desmin，48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA，随着培养时间的增长和传代次数的增加，细胞表达alpha-SMA，而不再表达Desmin，说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程，至培养第6d大多数细胞激活，传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型，目前研究发现：胰腺受损时，在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化，导致细胞形态、功能发生变化，促使基质、胶原蛋白的大量**及不规则沉积。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠胰腺星状细胞采用胶原酶制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的小鼠胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
兔股动脉内皮细胞 Rabbit femoral artery endothelial cells
小鼠肾腺癌细胞；RAG
小鼠小肠隐窝上皮细胞 Primary mouse small intestine crypt epithelial cells
小鼠杂交瘤细胞；T33-22A
TCCSUP (人膀胱癌细胞) (STR鉴定正确)
人结肠癌氟尿嘧啶耐药株
小鼠睾丸支持细胞
pCDNA3.1-his-TNFRSF4
NB4（人急性早幼粒细胞白血病细胞）(STR鉴定正确)
人十二脂肠腺癌；HuTu-80
人膀胱癌细胞；J82
C型凝集素受体CLEC13A抗体
Human IgG / Biotin
磷酸化S6核糖体蛋白抗体 (Ser240/244) Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244)
HumanHIF-3αELISAKit
DCL-1
人低氧诱导因子3α(HIF-3α)elisa生化检测试剂盒
活化T细胞核因子5蛋白抗体 Anti-NFAT5
Lp-PLA2 ELISA Kit
TRAPPC2
脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)elisa生化检测试剂盒
SEDL蛋白抗体
HHLA3蛋白抗体
氢离子转运ATP合成酶A1抗体 Anti-V-ATPase A1
螺旋转录因子OTP抗体 Anti-OTP
C1orf192
生物素化人IgG英文别名： Human Immunoglobulin IgG/Biotin
RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗体 Anti-RAB40B
谷氨酰胺转胺酶2抗体 Anti-Transglutaminase 2/TGase2
肿瘤坏死因子配体超家族成员9抗体 Anti-TNFSF9/CD137L
蛋白磷酸酶2A抑制剂1抗体 Anti-PHAP1
MICALCL
石蜡切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
ERK2结合睾丸蛋白1抗体
GGT1检测试剂盒
犬E选择素(SELE)elisa分析检测试剂盒
1号染色体开放阅读框192抗体
小鼠睾酮(T)elisa分析检测试剂盒
六磷酸肌醇激酶2抗体
Alpha 1 acid glycoprotein 2
大鼠12羟二十烷四烯酸(12-HETE)elisa分析检测试剂盒
IHPK2
小鼠胰腺星状细胞α-1-酸性糖蛋白2抗体
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。