原代细胞培养的具体操作步骤： 1.组织处理：将动物组织从机体中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理，使其分散成单个细胞。 2.细胞计数：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。 3.接种培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。 4.换液和传代：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。
产品货号
P-X2082
产品规格
5×105
组织来源
肾脏组织
生长特性
贴壁
细胞形态
不规则细胞
产品类别
兔原代细胞
传代特性
见说明
用途
仅供科研
肾小球为血液过滤器，肾小球壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构：内层为内皮、中层为肾小球基膜、外层为上皮细胞层，上皮细胞又称足细胞，其不规则突起称足突，其间有许多狭小间隙，血液经滤膜过滤后，滤液入肾小球囊。在正常情况下，血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中，仅小分子物质如尿素、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。
肾足细胞即肾小球上皮细胞，它附着于肾小球基底膜的外侧，连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞，体外培养的原代细胞不能增殖。
足细胞呈星型多突状，胞体较大，由胞体伸出许多突起，呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面，并通过黏附分子和蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连。
足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜的主要组成成分 IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶，从而在肾小球基底膜的代谢平衡中发挥重要作用。
细胞特性：
1）细胞来源于实验动物正常肾脏组织。
2)细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：不规则，含足突细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 DELF 原代 肾足 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。
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原代培养与传代培养的区别：
1. 细胞来源
原代培养：所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大，更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
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原代细胞培养的注意事项： 一、在进行原代细胞培养时，需要注意以下几点： 二、无菌操作：整个过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。 三、细胞融合和传代：跟踪细胞的融合状态，适时进行传代，避免细胞分化。 四、冷冻保存和复苏：对于需要长期保存的细胞，可以进行冷冻保存，并注意复苏时的操作细节。 五、培养基的选择和更换：根据细胞类型选择合适的培养基，并定期更换以保证营养充足。