原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例 1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。 2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。 3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。 4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。 注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。 5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
组织来源
手术切除的膀胱癌组织
货号
P-X1342
产品规格
5×105
生长特性
贴壁
产品类别
人原代细胞
细胞形态
成纤维样细胞
细胞详述：
膀胱癌是一种泌尿生殖系统肿瘤，发病率和死亡率较高，膀胱癌分为非肌浸润性膀胱癌与肌肉浸润性膀胱癌。
肿瘤微环境理论认为，肿瘤微环境与细胞外基质是肿瘤对化疗反应的重要决定因素。肿瘤微环境包括和非细胞，以及细胞外成分，在肿瘤复发和转移中起着重要的作用。其中，非细胞主要由肿瘤相关成纤维细胞构成。
成纤维细胞是实体瘤中主要的细胞，它们结合结缔组织的细胞外基质，是组织结构完整性的基础。已有研究表明，肿瘤相关成纤维细胞是肿瘤演进的重要促进剂，它们可通过分泌一种或多种可溶性因子如细胞因子、生长因子、趋化因子和基质降解酶等，肿瘤细胞响应这些可溶性因子作用，进而改变肿瘤细胞的生长方式机器发展演进过程。
细胞特性：
1）细胞来源于手术切除的膀胱癌组织。
2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
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注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。